一种基于CRISPR/Cas12a可视化检测IHHNV的试剂盒制造技术

本发明专利技术公开一种基于CRISPR/Cas12a的IHHNV可视化检测试剂盒，所述试剂盒将RAA与CRISPR/Cas 12a相结合，包含RAA引物和crRNA序列；本发明专利技术公开一种基于CRISPR/Cas 12a可视化检测IHHNV的检测方法，在37℃条件下扩增目的片段，通过荧光信号检测或胶体金侧向流试纸条的方式读取结果。本发明专利技术还公开一种基于CRISPR/Cas 12a可视化检测IHHNV的试剂盒、检测方法的应用，该试剂盒不依赖于精密仪器，特异性好，灵敏性高，在养殖场、口岸等实验条件相对简单情况下，实现对对虾IHHNV的快速现场检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物检测，具体涉及一种基于crispr/cas12a可视化检测传染性皮下和造血器官坏死病毒的试剂盒，具体是一种基于crispr/cas12a检测传染性皮下和造血器官坏死病毒的序列组合、检测试剂盒、检测方法和应用。

技术介绍

1、传染性皮下和造血器官坏死病毒（infectious hypodermal and haematopoieticnecrosis virus，ihhnv）对虾养殖中最常见的疾病之一，1981年首次在美国夏威夷的细角滨对虾中发现 [lightner，1983]，随后在许多甲壳类和非甲壳类物种检测到，在亚洲、大洋洲、北美洲、南美洲和中东地区的对虾养殖地区广泛流行，是世界动物卫生组织（woldorganisation for animal health, woah）列为需申报的甲壳类动物疫病。ihhnv是已知最小的对虾病毒，直径20-22nm，是无包膜的二十面体，长度约4.1kb线性单链dna。ihhnv感染造成的影响有些是急性，有些是慢性的，因对虾品种而异。感染ihhnv细角滨对虾会引起急性死亡，死亡率接近100%。而南美白本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于CRISPR/Cas 12a可视化检测IHHNV的序列组合，其特征在于，包括针对IHHNV的恒温扩增特异性RAA引物和crRNA序列；

2.一种基于CRISPR/Cas 12a可视化检测IHHNV的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含权利要求1所述的针对IHHNV的恒温扩增特异性RAA引物和crRNA序列和单链DNA报告探针序列。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括用于RAA扩增反应的反应试剂和用于进行CRISPR/Cas 12a反应的试剂。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述用于RAA扩增的反应试剂的总...

【技术特征摘要】

1.一种基于crispr/cas 12a可视化检测ihhnv的序列组合，其特征在于，包括针对ihhnv的恒温扩增特异性raa引物和crrna序列；

2.一种基于crispr/cas 12a可视化检测ihhnv的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含权利要求1所述的针对ihhnv的恒温扩增特异性raa引物和crrna序列和单链dna报告探针序列。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括用于raa扩增反应的反应试剂和用于进行crispr/cas 12a反应的试剂。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述用于raa扩增的反应试剂的总体积为50ul，反应试剂包括干粉酶制剂、水、raa上游引物ihhnv f2、raa下游引物ihhnv-raa-r1、a buffer、b buffer和待检dna核酸。

5.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述用于进行crispr/cas 12a反应的试剂总体积为50u...

【专利技术属性】
技术研发人员：李家侨，谢艳辉，张娜，杨金金，尹伟力，刘荭，郑晓聪，刘建芳，
申请(专利权)人：湛江海关技术中心，
类型：发明
国别省市：