基于磁珠磁分离-信号输出双重功能的恩诺沙星可视化快速检测方法技术

本发明专利技术公开了一种基于磁珠磁分离‑信号输出双重功能的恩诺沙星可视化快速检测方法。本发明专利技术方法具体为：1)在粒径为100～1000nm的羧基化磁珠表面修饰恩诺沙星单克隆抗体，封闭后得到免疫磁珠分散液；2)将恩诺沙星‑牛血清白蛋白复合物与粒径为10～50nm的羧基化磁珠偶联，封闭后得到标记磁珠分散液；3)将免疫磁珠分散液与样品溶液混合，反应后得到混合分散液；4)将标记磁珠分散液与混合分散液混合，反应后经磁分离取清液，并检测清液在405nm下的吸光度；5)将吸光度代入标准曲线，得到恩诺沙星浓度。本发明专利技术方法简单、快速、灵敏度高，而且具备可视化定性/半定量的能力，可现场快速检测恩诺沙星。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及可视化检测领域，具体涉及一种基于磁珠磁分离-信号输出双重功能的恩诺沙星可视化快速检测方法。

技术介绍

1、恩诺沙星(enrofloxacin，enr)，又称乙基环丙沙星，是一种氟喹诺酮类抗生素，能通过抑制dna旋转酶的活性达到杀菌的作用，具有抗菌范围广、抗菌活性大、组织穿透力强等特点，被广泛应用于水产、畜禽动物的疾病治疗。但是该药物会对人体造成潜在的毒副作用，而且大量使用会诱发细菌耐药性，危害人类健康。恩诺沙星和环丙沙星的总量在水产品等动物性食品的肌肉组织中的最高限量为100μg/kg。因此实现恩诺沙星的快速、灵敏检测显得尤为重要。

2、恩诺沙星残留的传统检测方法主要包括微生物抑制法和以液相色谱-质谱联用为代表的仪器分析法。仪器分析法具有灵敏度高和检测限低的优势，是如今检测恩诺沙星的标准方法，但其前处理复杂且需要专业人员操作和昂贵的精密仪器，无法实现现场检测；微生物抑制法耗时且不稳定，缺乏时效性。近年来，以酶联免疫吸附法(elisa)和侧流免疫层析法(lfia)等为代表的快速检测方法发展迅速。但是，elisa在检测过程中需反复洗涤本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于磁珠磁分离-信号输出双重功能的恩诺沙星可视化快速检测方法，其特征在于：包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的基于磁珠磁分离-信号输出双重功能的恩诺沙星可视化快速检测方法，其特征在于：所述步骤4)中，反应结束后，进行1～2次富集处理，再进行磁分离取清液；所述富集处理的过程为：经磁分离后，将沉淀重悬于清液中。

3.根据权利要求1所述的基于磁珠磁分离-信号输出双重功能的恩诺沙星可视化快速检测方法，其特征在于：所述步骤1)中，所述活化载体磁珠与恩诺沙星单克隆抗体的质量比为1：0.02～0.1；所述步骤2)中，所述活化的前标记磁珠与恩诺沙星-牛血清白蛋白复合物...

【技术特征摘要】

1.一种基于磁珠磁分离-信号输出双重功能的恩诺沙星可视化快速检测方法，其特征在于：包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的基于磁珠磁分离-信号输出双重功能的恩诺沙星可视化快速检测方法，其特征在于：所述步骤4)中，反应结束后，进行1～2次富集处理，再进行磁分离取清液；所述富集处理的过程为：经磁分离后，将沉淀重悬于清液中。

3.根据权利要求1所述的基于磁珠磁分离-信号输出双重功能的恩诺沙星可视化快速检测方法，其特征在于：所述步骤1)中，所述活化载体磁珠与恩诺沙星单克隆抗体的质量比为1：0.02～0.1；所述步骤2)中，所述活化的前标记磁珠与恩诺沙星-牛血清白蛋白复合物之间的质量比为4：3。

4.根据权利要求1所述的基于磁珠磁分离-信号输出双重功能的恩诺沙星可视化快速检测方法，其特征在于：所述步骤3)中的免疫磁珠与所述步骤4)中的标记磁珠之间的质量比为100：5～15。

5.根据权利要求1所述的基于磁珠磁分离-信号输出双重功能的恩诺沙星可视化快速检测方法，其特征在于：所述步骤4)中，所述特定波长为405nm。

6.根据权利要求1所述的基于磁珠磁分离-信号输出双重功能的恩诺沙星可视化快速检测方法，其特征在于：所述待检测样品溶液中，恩诺沙星...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈亚芳，汪江琦，郝贵杰，周冬仁，徐铃威，杨庆满，张海琪，郑阿钦，崔雁娜，
申请(专利权)人：浙江省淡水水产研究所，
类型：发明
国别省市：