一种Ⅱ-B型核酸内切酶介导的基因编辑系统及用途技术方案

本发明专利技术公开了一种Ⅱ‑B型核酸内切酶介导的基因编辑系统及用途，具体地，本发明专利技术利用宏基因组学结合实验鉴定出一种属于Ⅱ‑B型Cas9家族的Gs9‑1核酸酶，其识别含有NGG的PAM序列，且引导RNA（sgRNA）需要特定的骨架序列。本发明专利技术还建立了基于Gs9‑1核酸酶介导的基因组靶向编辑技术，在对基因组序列进行精确修饰，诱导基因组中的插入、缺失或碱基替换的技术领域具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因编辑，具体地涉及一种ⅱ-b型核酸内切酶介导的基因编辑系统及用途。

技术介绍

1、将原核生物免疫系统crispr-cas重新用于基因组工程，彻底改变了生物
，使其在科学研究、生物医学和农业领域得到广泛应用。众所周知，crispr-cas系统在细菌和古细菌中天然具有适应性免疫机制的功能，包括三个主要阶段：适应、表达和干扰。在适应阶段，cas蛋白的一个独特复合体与目标dna结合，通常是在识别了一个独特的、被称为原空间相邻基序(pam)的短基序后，裂解出目标dna的一部分，即原空间相邻基序。在crispr阵列的5′端复制重复序列后，适应复合体将原间隔物dna插入阵列，使其成为间隔物。有些crispr-cas系统采用另一种适应机制，即通过crispr-cas基因座编码的反转录酶进行反转录，从rna中获取间隔物。在表达阶段，crispr阵列通常转录为单个转录本，即前crispr rna(pre-crrna)，然后加工成成熟的crispr rna(crrna)，每个rna都包含间隔序列和部分侧翼重复序列。在不同的crispr-cas变体中，前cr本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.CRISPR/Cas系统中的核酸内切酶，其特征在于，包括以下蛋白：

2.融合蛋白，其特征在于，包含权利要求1所述蛋白和其他修饰部分。

3.多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸为编码权利要求1所述核酸内切酶的多核苷酸，或编码权利要求2所述融合蛋白的多核苷酸。

4.载体，其特征在于，所述载体包含权利要求3所的多核苷酸。

5.宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞包含权利要求3所述的多核苷酸或权利要求4所述的载体。

6.权利要求1所述的核酸内切酶，或权利要求2所述的融合蛋白，或权利要求3所述的多核苷酸，或权利要求4所述的载体，或权利要求...

【技术特征摘要】

1.crispr/cas系统中的核酸内切酶，其特征在于，包括以下蛋白：

2.融合蛋白，其特征在于，包含权利要求1所述蛋白和其他修饰部分。

3.多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸为编码权利要求1所述核酸内切酶的多核苷酸，或编码权利要求2所述融合蛋白的多核苷酸。

4.载体，其特征在于，所述载体包含权利要求3所的多核苷酸。

5.宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞包含权利要求3所述的多核苷酸或权利要求4所述的载体。

6.权利要求1所述的核酸内切酶，或权利要求2所述的融合蛋白，或权利要求3所述的多核苷酸，或权利要求4所述的载体，或权利要求5所述的宿主细胞在基因编辑中的应用。

7.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢胜松，赵书红，李新云，徐兵荣，陶大刚，李晟，阮进学，赵长志，刘小磊，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：