一种腺相关病毒亲和纯化离心柱制造技术

技术编号:43520246 阅读:11 留言:0更新日期:2024-12-03 12:09
一种腺相关病毒亲和纯化离心柱,包括样品内管以及套设在样品内管外部的滤出液收集管;所述样品内管的下部设有亲和填料装填段,所述亲和填料装填段的上侧设有上层过滤装置,下侧设有下层过滤装置,所述亲和填料含有单域抗体,所述单域抗体包括CDR1、CDR2、以及CDR3;本发明专利技术所述的腺相关病毒亲和纯化离心柱能够有效纯化AAV2、AAV5以及AAV8,且离心柱的操作简单,使用者只需要将腺相关病毒进行简单的粗处理即可制得满足离心纯化得条件,而且不需要配合超速离心机和蛋白纯化仪即可完成纯化,极大的减少了实验时间和成本。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及离心柱领域,尤其涉及一种腺相关病毒亲和纯化离心柱


技术介绍

1、腺相关病毒具有能长期表达、低毒性、低免疫原性以及高组织特异性等优势,因此逐渐成为基因治疗领域最重要的基因载体之,且被广泛应用。针对腺相关病毒的纯化现在已经由多种方式。其中,氯化铯(cscl)/碘克沙醇密度梯度离心是最传统的aav纯化技术,这种技术适用于所有血清型且分辨率高,但是因生产工艺很难放大,低通量且需要超速离心机等缺点阻碍了其在研发中快速获得纯化后的腺相关病毒以及在工业生产中的大规模放大,而且氯化铯(cscl)及碘克沙醇在最终产物中还需要得到控制和检测,也一定程度上提升了研发难度和后续的生产中的工艺挑战。其次,离子交换色谱也是应用较为广泛的纯化方式之一,但是其对工艺摸索较为苛刻,而且批次间差异较大,上下游工艺的衔接要求较高,多为腺相关病毒一步亲和纯化后采取的精纯方案。那么,腺相关病毒纯化就不得不提到亲和填料,因其纯化效率高,一次纯化即可有效地减少杂质;与akta设备相结合后可用于大规模aav的纯化。但是在研发工作中,如何快速并便捷地获得纯度较高的腺相关病毒是一个挑战。本专本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种腺相关病毒亲和纯化离心柱,其特征在于,包括样品内管(1)以及套设在样品内管(1)外部的滤出液收集管(2);所述样品内管(1)的下部设有亲和填料装填段(3),所述亲和填料装填段(3)的上侧设有上层过滤装置(4),下侧设有下层过滤装置(5),所述亲和填料含有单域抗体,所述单域抗体包括CDR1、CDR2、以及CDR3,

2.根据权利要求1所述的腺相关病毒亲和纯化离心柱,其特征在于,所述上层过滤装置(4)包括由上至下依次设置的上层卡环(41)、上层滤片(42)和上层网状塑料垫片(43);所述下层过滤装置(5)包括由上至下依次设置的下层卡环(51)、下层滤片(52)和下层网状塑...

【技术特征摘要】

1.一种腺相关病毒亲和纯化离心柱,其特征在于,包括样品内管(1)以及套设在样品内管(1)外部的滤出液收集管(2);所述样品内管(1)的下部设有亲和填料装填段(3),所述亲和填料装填段(3)的上侧设有上层过滤装置(4),下侧设有下层过滤装置(5),所述亲和填料含有单域抗体,所述单域抗体包括cdr1、cdr2、以及cdr3,

2.根据权利要求1所述的腺相关病毒亲和纯化离心柱,其特征在于,所述上层过滤装置(4)包括由上至下依次设置的上层卡环(41)、上层滤片(42)和上层网状塑料垫片(43);所述下层过滤装置(5)包括由上至下依次设置的下层卡环(51)、下层滤片(52)和下层网状塑料垫片(53)。

3.根据权利要求2所述的腺相关病毒亲和纯化离心柱,其特征在于,所述上层滤片(42)的滤孔孔径约为0.3-0.8微米;所述下层滤片(52)的滤孔孔径为0.3-0.8微米。

4.根据权利要求1所述的腺相关病毒亲和纯化离心柱,其特征在于,所述样品内管(1)的底部设有出液口(6),所述样品内管(1)上部设有与滤出液收集管(2)卡接的卡接部(7)...

【专利技术属性】
技术研发人员:王安林蔡晓龙韩秋琴张晓妍
申请(专利权)人:上海药诺生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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