一种用于等温条件下鉴别诊断羊尤氏泰勒虫的试剂盒及可视化检测方法技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，具体涉及一种用于等温条件下鉴别诊断羊尤氏泰勒虫的试剂盒及可视化检测方法；提供了尤氏泰勒虫的靶序列和LAMP引物组，包括FIP引物、BIP引物、F3引物、B3引物、LF引物和LB引物；并筛选建立了LAMP体系：内外引物浓度比例为2:1～12:1，MgSO<subgt;4</subgt;的浓度为2～12mmol/L，dNTP Mix的浓度为0.6～2.2mmol/L，反应温度设置为59～66℃，反应时间设置20～70min；使用LAMP引物组和LAMP体系制备了用于检测尤氏泰勒虫的试剂盒，通过可视化试纸条判定结果，具有特异性高、敏感性高以及临床可行性强的特点，且操作简单，不需要复杂的仪器，检测成本低。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，具体涉及一种用于等温条件下鉴别诊断羊尤氏泰勒虫的试剂盒及可视化检测方法。

技术介绍

1、羊泰勒虫病是一种蜱传性血液原虫病，目前公认感染羊的泰勒虫有6种，分别是尤氏泰勒虫、吕氏泰勒虫、绵羊泰勒虫、莱氏泰勒虫、分离泰勒虫、隐藏泰勒虫。我国报道的羊泰勒虫主要有尤氏泰勒虫、吕氏泰勒虫、绵羊泰勒虫。羊感染泰勒虫后，精神状态会越来越差，情绪不稳定，出现抑郁倾向，食欲差或不进食，高烧，心律不齐、贫血、淋巴结肿大等症状。且各泰勒虫之间的症状并无显著的差异，因此，无法仅仅通过临床症状判断感染的类型。

2、目前，羊泰勒虫病实验室诊断的方法主要有病原形态观察、血清学检测及pcr检测。血涂片或淋巴结涂片染色法是最传统的实验室诊断方法，该方法简便、廉价，但是依赖于检测人员的寄生虫形态学经验，当染虫率较低或隐性感染时存在漏检，该方法的准确性有待验证，且上述方法忽略了载体动物，干扰信号从成像焦平面以外进入而使画面分辨率降低，而且由于不同种泰勒虫在形态上具有相似性而难以区别。

3、随着检测技术的不断更新，羊泰勒虫病的检测方法也有了迅速的发展。间本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于检测尤氏泰勒虫的靶序列，其特征在于，所述靶序列的核苷酸序列如SEQID NO.29所示。

2.一种用于检测尤氏泰勒虫LAMP引物组，其特征在于，所述LAMP引物组包括FIP引物、BIP引物、F3引物、B3引物、LF引物和LB引物；所述FIP引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，所述BIP引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示，所述F3引物的核苷酸序列如SEQ IDNO.3所示，所述B3引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述LF引物的核苷酸序列如SEQID NO.27所示，所述LB引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.28所示。

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【技术特征摘要】

1.一种用于检测尤氏泰勒虫的靶序列，其特征在于，所述靶序列的核苷酸序列如seqid no.29所示。

2.一种用于检测尤氏泰勒虫lamp引物组，其特征在于，所述lamp引物组包括fip引物、bip引物、f3引物、b3引物、lf引物和lb引物；所述fip引物的核苷酸序列如seq id no.5所示，所述bip引物的核苷酸序列如seq id no.6所示，所述f3引物的核苷酸序列如seq idno.3所示，所述b3引物的核苷酸序列如seq id no.4所示，所述lf引物的核苷酸序列如seqid no.27所示，所述lb引物的核苷酸序列如seq id no.28所示。

3.一种用于检测尤氏泰勒虫的的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒包括权利要求2所述的lamp引物组，所述fip引物的5′端标记异硫氰酸荧光素，所述lf引物的5′端标记生物素。

【专利技术属性】
技术研发人员：赵帅阳，朱浩瀚，刘军龙，张少华，关贵全，罗建勋，殷宏，
申请(专利权)人：中国农业科学院兰州兽医研究所中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心，
类型：发明
国别省市：

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