一种3-岩藻糖基乳糖的分批补料发酵生产方法技术

本发明专利技术属于微生物发酵工程领域，具体涉及一种3‑岩藻糖基乳糖的分批补料发酵生产方法。该方法采用保藏编号为CGMCC NO.27189的大肠埃希氏菌为生产菌株，发酵过程中检测发酵培养基中甘油浓度、乳糖浓度、细胞密度指标OD600nm、pH和溶氧量，使发酵培养基中甘油终浓度不低于20g/L，乳糖浓度不低于10g/L，发酵培养基的pH为6.6~6.8，控制通气量为1.0vvm~2.0vvm、搅拌桨转速200rpm~700rpm，并对流加用a‑乳糖母液进行灭菌60℃保温和NaOH预处理。动态检测显示，该方法可提高3‑岩藻糖基乳糖的生产效率，更好的满足市场需求。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于微生物发酵工程领域，具体涉及一种3-岩藻糖基乳糖的分批补料发酵生产方法。

技术介绍

1、3-岩藻糖基乳糖（3-fucosyllactose，3-fl），cas 登记号 41312-47-4，是一种白色至象牙色粉末。作为母乳低聚糖的主要成分之一，3-fl具有调节肠道菌群等作用，在婴幼儿食品行业具有广阔应用前景。与对2'-岩藻糖基乳糖的广泛研究相比，目前业内对3-fl研究报道较少。但根据安全性评估，3-fl无急性口服毒性、遗传毒性和亚急性毒性，已被公认为安全物质(《safety of 3-fl (3-fucosyllactose) as a novel food pursuant toregulation (eu) 2015/2283》，请见efsa j. 期刊2021年19卷6期e06662)。美国食品药品监督管理局已受理并通过3-fl相关婴幼儿用产品的注册申请，例如grn000925。3-fl成为200多种母乳低聚糖中，目前为止已实现商业化的7种母乳低聚糖之一。该产品中3-fl采用基因工程改造的大肠埃希氏菌( es本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种3-岩藻糖基乳糖的分批补料发酵生产方法，其特征在于，所述生产方法采用保藏编号为CGMCC NO.27189的大肠埃希氏菌进行3-岩藻糖基乳糖的发酵生产；所述生产方法以甘油为碳源，所述生产方法的补料策略为：当发酵培养基中甘油浓度<10g/L时向发酵培养基中流加甘油，使发酵培养基中甘油终浓度不低于20g/L；细胞密度指标OD600nm达到20时，降低温度至诱导温度32℃，同时向发酵培养基中流加异丙基-β-D-硫代半乳糖吡喃糖苷和a-乳糖母液使发酵培养基中乳糖终浓度达到10g/L；当发酵培养基中乳糖浓度<5g/L时，向发酵培养基中流加a-乳糖使发酵培养基中乳糖浓度不低于10...

【技术特征摘要】

1.一种3-岩藻糖基乳糖的分批补料发酵生产方法，其特征在于，所述生产方法采用保藏编号为cgmcc no.27189的大肠埃希氏菌进行3-岩藻糖基乳糖的发酵生产；所述生产方法以甘油为碳源，所述生产方法的补料策略为：当发酵培养基中甘油浓度<10g/l时向发酵培养基中流加甘油，使发酵培养基中甘油终浓度不低于20g/l；细胞密度指标od600nm达到20时，降低温度至诱导温度32℃，同时向发酵培养基中流加异丙基-β-d-硫代半乳糖吡喃糖苷和a-乳糖母液使发酵培养基中乳糖终浓度达到10g/l；当发酵培养基中乳糖浓度<5g/l时，向发酵培养基中流加a-乳糖使发酵培养基中乳糖浓度不低于10g/l；所述a-乳糖母液单独配制，升温至60℃加入氢氧化钠调节ph至10~11，然后115℃灭菌30min后降温至60℃保温，用于流加程序；监测发酵培养基的ph和溶氧量，流加ph调节剂控制发酵培养基的ph为6.6~6.8；发酵过程中控制通气量为1.0vvm~2.0vvm、搅拌桨转速200rpm~700rpm。

2.根据权利要求1所述的生产方法，其特征在于，所述生产方法使用的发酵培养基组成为：甘油 20g/l、kh2po4 5g/l、k2hpo4 5g/l、(nh4)2so4 4.0g/l、一...

【专利技术属性】
技术研发人员：宗剑飞，肖卫华，张小凤，刘峰，
申请(专利权)人：山东合成远景生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：