【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分子生物学领域,具体涉及一种3’mrna测序文库的构建方法。
技术介绍
1、在过去的十年中,rna-seq已经成为全转录组范围内分析差异基因表达和mrnas差异剪接的重要工具,被应用于研究rna生物学的方方面面,包括基因表达、翻译(翻译组,translatome)、rna结构(结构组,structurome)、调节性rna、rna表观遗传学以及rna动力学等。随着下一代测序技术的革新,rna-seq技术也得到了不断发展,其应用领域也得到了不断拓展,例如空间转录学(spatialomics)等。加上近年来长读长测序和直接rna-seq(direct rna-seq)技术的应用以及数据分析计算工具的进一步整合,rna-seq技术的创新使人们对rna生物学有了更全面的理解。
2、在常规的rna-seq测序流程中,通常会包含以下几个步骤,mrna富集或去除核糖体rna(这里需要跟rna的质量以及研究方向进行相应选择,对于降解的rna样品,如rin<7的样品应选择去除核糖体rna),rna片段化,第一链cdna合成
...【技术保护点】
1.一种3’mRNA测序文库的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,回收双链合成产物包括:
3.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,以所述双链合成产物为模板进行PCR文库扩增包括:
4.根据权利要求1至3任一项所述的构建方法,其特征在于,所述逆转录体系包括逆转录酶和逆转录引物,所述逆转录引物包括带有Nextera Read2序列与条码序列的poly(T)VN引物接头。
5.根据权利要求1至3任一项所述的构建方法,其特征在于,所述双链合成随机引物包含Nextera Rea
...【技术特征摘要】
1.一种3’mrna测序文库的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,回收双链合成产物包括:
3.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,以所述双链合成产物为模板进行pcr文库扩增包括:
4.根据权利要求1至3任一项所述的构建方法,其特征在...
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