提高冻存卵母细胞发育能力的siRNA及其应用制造技术

本发明专利技术公开了提高冻存卵母细胞发育能力的siRNA及其应用，属于卵母细胞超低温冷冻保存技术领域，提供的提高冻存卵母细胞发育能力的siRNA分子，所述siRNA分子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，提供的所述siRNA分子在制备提高冷冻保存卵母细胞发育能力制剂中的应用。提供了靶向抑制Atf5基因表达的siRNA，显微注射至卵母细胞胞质，可特异性地沉默靶基因mRNA表达，Atf5基因表达量显著降低，冷冻应激下线粒体功能得以维持，冷冻卵母细胞发育能力提高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于卵母细胞超低温冷冻保存，尤其涉及提高冻存卵母细胞发育能力的sirna及其应用。

技术介绍

1、卵母细胞冷冻保存是生育力保存的基本手段，在辅助生殖技术中发挥重要作用。尽管卵母细胞冷冻技术已取得长足进步，但冷冻卵母细胞解冻后发育能力下降，较低的冷冻效率已成为制约冷冻卵母细胞应用的主要限制因素。线粒体功能是卵母细胞正常发育的保障，而线粒体对冷冻解冻过程中的温度、渗透压变化极为敏感，研究指出冷冻卵母细胞中线粒体形态及空间分布异常，冷冻可引发线粒体功能异常。鉴于线粒体在卵母细胞发育中的关键作用，维持线粒体功能可提高冷冻卵母细胞发育能力。

2、线粒体未折叠蛋白反应(mtupr)是线粒体应对外界环境刺激的主要应答机制，线粒体分子伴侣热休克蛋白60(hsp60)是mtupr发生的生物标记物，在线粒体功能维持中发挥关键作用。激活转录因子5(atf5)是哺乳动物mtupr发生的关键调控因子，研究表明atf5是哺乳动物细胞线粒体应激后细胞器恢复所必需的。目前，atf5对冷冻卵母细胞线粒体功能及发育能力的影响尚不知晓。

3、rna干扰(rna本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.提高冻存卵母细胞发育能力的siRNA分子，其特征在于，所述siRNA分子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。

2.如权利要求1所述siRNA分子在制备提高冷冻保存卵母细胞发育能力制剂中的应用。

3.根据权利要求2所述应用，其特征在于，所述冷冻保存为-196℃超低温冷冻保存。

4.根据权利要求2所述应用，其特征在于，所述siRNA分子通过抑制Atf5基因的表达，进而维持线粒体功能，提高冷冻保存卵母细胞发育能力。

5.根据权利要求4所述应用，其特征在于，所述Atf5基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。...

【技术特征摘要】

1.提高冻存卵母细胞发育能力的sirna分子，其特征在于，所述sirna分子的核苷酸序列如seq id no.1和seq id no.2所示。

2.如权利要求1所述sirna分子在制备提高冷冻保存卵母细胞发育能力制剂中的应用。

3.根据权利要求2所述应用，其特征在于，所述冷冻保存为-196℃超低温冷冻保存。

4.根据权利要求2所述应用，其特征在于，所述sirna分子通过抑制atf5基因的表达，进而维持线粒体功能，提高冷冻保存卵母细胞发育能力。

5.根据权利要求4所述应用，其特征在于，所述atf5基因的核苷酸序...

【专利技术属性】
技术研发人员：傅祥伟，李俊，周桂珍，刘爱菊，白佳琛，罗渝雯，依再提古丽·热依木江，朱一笑，侯云鹏，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：