一种驴源大肠杆菌噬菌体的解聚酶Dp14及其应用制造技术

本发明专利技术属于生物工程技术领域，具体涉及一种驴源大肠杆菌噬菌体的解聚酶Dp14及其应用。本发明专利技术提供的解聚酶Dp14的基因序列如SEQ ID NO.1所示。本发明专利技术成功表达和纯化了噬菌体解聚酶Dp14并研究了其对大肠杆菌的抑制作用。在对15株不同来源大肠杆菌的检测中，结果显示解聚酶Dp14只针对驴源大肠杆菌EH‑1具有抑菌作用，具有较强的特异性；对浓度和时间具有依赖性，浓度越高，作用时间越长，晕环越大；解聚酶Dp14对高温的耐受性差，50℃及以上的温度会失去抑菌菌效果；生物被膜试验表明解聚酶Dp14具有抑制大肠杆菌形成生物膜的能力，与健康驴血清联合应用，其抑菌效果与单独使用相比更加显著。本发明专利技术提供的解聚酶与血清之间存在协同作用，能够增强杀菌效果。这种联合使用的方法为大肠杆菌耐药菌株感染的治疗提供了新思路。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程，具体涉及一种驴源大肠杆菌噬菌体的解聚酶dp14及其应用。

技术介绍

1、大肠杆菌作为一种常见的条件致病菌，可以引起人和多种动物的局部和全身性感染。近几年随着驴产业的快速发展，大肠杆菌引起的腹泻成为影响驴驹成活率的重要病原因素。驴驹腹泻主要集中在从出生到2月龄阶段，主要表现为排出水样或糊状粪便，粪便中含有血液和凝乳块。病情加重时可能出现卧位、昏迷和死亡。驴驹腹泻造成的经济损失严重影响着养驴业的发展，所以解决大肠杆菌引起的驴驹腹泻至关重要。

2、抗生素是治疗细菌感染的首选药物。因抗生素的的大量不合理应用，导致大肠杆菌耐药菌株普遍存在。生物被膜的形成是大肠杆菌耐药性的一个重要原因。生物被膜作为大肠杆菌的保护屏障，除了帮助细菌在不利环境条件下（如营养缺乏、干燥等）保持存活外，还对抗生素等抗菌药物的耐受性显著增强，并能够抵御免疫细胞的攻击，这大大增加了治疗难度和成本。针对临床利用抗生素对大肠杆菌感染的治疗效果欠佳的现状，迫切需要开发新型抗菌制剂。

3、噬菌体对细菌具有良好的杀灭效果，但噬菌体也容易产生耐受菌，而细菌不易本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种驴源大肠杆菌噬菌体的解聚酶Dp14，其特征在于，所述解聚酶Dp14的基因序列如SEQ ID NO.1所示。

2.一种如权利要求1所述的解聚酶Dp14的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，解聚酶Dp14的基因片段获得过程中，扩增所使用的引物为：

4.根据权利要求2或3所述的制备方法，其特征在于，所述质粒载体为pCold TF载体；所述感受态细胞为BL21(DE3)。

5.根据权利要求2-4任一项所述的制备方法，其特征在于，所述培养为：将重组宿主细胞，挑取单菌落放入到5 mL的Amp肉汤中...

【技术特征摘要】

1.一种驴源大肠杆菌噬菌体的解聚酶dp14，其特征在于，所述解聚酶dp14的基因序列如seq id no.1所示。

2.一种如权利要求1所述的解聚酶dp14的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，解聚酶dp14的基因片段获得过程中，扩增所使用的引物为：

4.根据权利要求2或3所述的制备方法，其特征在于，所述质粒载体为pcold tf载体；所述感受态细胞为bl21(de3)。

5.根据权利要求2-4任一项所述的制备方法，其特征在于，所述培养为：将重组宿主细胞，挑取单菌落放入到...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘文华，马宇，马瑞雪，张灿，邹玲，张晓轩，赵健超，吴莹，
申请(专利权)人：青岛农业大学，
类型：发明
国别省市：