一种改进原位邻位连接技术检测效率的方法技术

本发明专利技术公开了一种改进原位邻位连接技术检测效率的方法，包括如下步骤：(1)将第一一抗以及第二一抗共同处理待测样品；(2)将第一二抗和第二二抗分别与第一寡核苷酸和第二寡核苷酸偶联，构建形成第一偶联物和第二偶联物；(3)将上述第一偶联物和第二偶联物共同处理待测样品；(4)先加入一夹板探针进行处理，再加入成环探针进行处理以获得环状模板，接着基于该环状模板进行滚环扩增以获得滚环扩增产物；然后加入检测探针进行处理，以识别滚环扩增产物，进而通过检测设备进行检测以确定上述第一蛋白和第二蛋白的互作情况。本发明专利技术实现了对细胞和组织中蛋白质相互作用的定量和定位检测，提升了蛋白质相互作用检测的灵敏度和效率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于原位蛋白质组学，具体涉及一种改进原位邻位连接技术检测效率的方法。

技术介绍

1、蛋白质的空间表达对于精确识别组织中蛋白质的定位和功能至关重要，并且与蛋白质在健康和疾病中的功能密切相关。因此，捕获空间和原位蛋白质组——即蛋白质在亚细胞水平上的定位及其动态变化——对于全面了解细胞生物学具有重要意义。原位蛋白质组学是一种研究蛋白质在细胞或组织中的分布、定位、相互作用和功能的技术，它是蛋白组学的一个重要分支，与传统蛋白质组学技术相比，它提供了更高的空间分辨率和更准确的定量能力。

2、基于抗体-寡核苷酸偶联物的原位蛋白质成像技术为哺乳动物中大量细胞类型和蛋白质相互作用提供了关键的空间定位信息。监测细胞和组织中的蛋白质相互作用可以揭示细胞和分子结构之间的复杂反应。蛋白质相互作用在多种细胞过程中发挥核心作用，包括翻译后修饰(如磷酸化)、信号转导、神经发育和癌症。目前，已有多种方法被证明能够有效检测蛋白质相互作用。例如，传统的原位邻近连接技术已成为识别细胞和组织中相互作用蛋白质的常用方法。该技术主要使用一对抗体-寡核苷酸偶联物和滚环扩增来可视化目本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种改进原位邻位连接技术检测效率的方法，其特征在于：包括如下步骤：

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(4)中，先加入一夹板探针进行处理，该夹板探针分别与上述第一寡核苷酸和第二寡核苷酸的序列的一部分互补配对，使得上述第一寡核苷酸和第二寡核苷酸彼此靠近，形成稳定的V形结构。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述检测探针标记有荧光基团。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述第一一抗和第二一抗的种属来源不同。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于：所述第一二抗和第二二抗的种属来源相同或不同。

6.如...

【技术特征摘要】

1.一种改进原位邻位连接技术检测效率的方法，其特征在于：包括如下步骤：

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(4)中，先加入一夹板探针进行处理，该夹板探针分别与上述第一寡核苷酸和第二寡核苷酸的序列的一部分互补配对，使得上述第一寡核苷酸和第二寡核苷酸彼此靠近，形成稳定的v形结构。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述检测探针标记有荧光基团。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述第一一抗和第二一抗的种属来源不同。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于：所述第一二抗和第二...

【专利技术属性】
技术研发人员：柯荣秦，邱颖辉，林辰，马伟燕，
申请(专利权)人：华侨大学，
类型：发明
国别省市：