一种3D细胞NASH药物筛选模型及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种3D细胞NASH药物筛选模型及应用，涉及生物工程技术领域，其采用肝实质细胞L02和肝星状细胞LX2进行共培养并使用棕榈酸和油酸制备的诱导液进行诱导构建得到；所述诱导液的制备方法为：A1：向棕榈酸中添加水和无水乙醇，混匀，加入油酸后加热，使油酸溶解；A2：将混合物中加入10mM氢氧化钠溶液，混匀后再加入10％的BSA溶液；A3：使用0.22μm滤膜过滤后，液相即为诱导液。本发明专利技术提供了一种构建过程简单，材料简单，便于在各个实验室中推广的体外3D细胞模型，能够统一细胞模型的标准，且能够实现高通量NASH药物筛选，在对NASH药物的筛选过程中，具有良好的准确性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物工程，具体涉及一种3d细胞nash药物筛选模型及应用。

技术介绍

1、临床前实验所用的nash模型应能够合理地重复模拟临床上观察到的各种疾病表型，如肥胖、胰岛素抵抗、肝脏脂肪堆积等的发病机制，同时需要具有nash的具体特征，包括肝脂肪变性、气球样变、小叶炎症及纤维化。现有技术中，一般采用动物模型或单一细胞模型作为nash模型，进行药物的筛选。

2、对于现有的动物模型，由于啮齿类动物在基因表型上与人类不同，导致在小鼠上成功实验的药物，在进入临床研究时则无药效，且小鼠的实验成本高、实验周期长以及不便于大规模培养等诸多问题，限制了其在高通量药物筛选上的应用。

3、目前绝大多数体外肝脏nash模型仍然通过使用2d细胞培养，通常采用2d细胞模型进行nash病理发展的模拟和药物的筛选，能够以更低的耗费及更高的效率进行药物筛。但是，同时也存在很多不足，比如缺乏细胞因子等细胞功能的关键因素，缺少细胞-细胞相互作用和空间结构，从而影响药物在体外筛选的准确性。而新型的3d细胞培养技术能在一定程度上克服这些困难。但是构建和制备3d细胞模本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种3D细胞NASH药物筛选模型，其特征在于，采用肝实质细胞L02和肝星状细胞LX2进行共培养并使用棕榈酸和油酸制备的诱导液进行诱导构建得到；

2.根据权利要求1所述的3D细胞NASH药物筛选模型，其特征在于，所述诱导液中，棕榈酸与水和无水乙醇的比例为5.25～17mg∶0.5mL∶0.5mL；棕榈酸和油酸的质量比为1∶2～2∶1；且氢氧化钠溶液与水的体积比为1∶25；BSA溶液与水的体积比为18∶1。

3.根据权利要求1所述的3D细胞NASH药物筛选模型，其特征在于，所述3D细胞NASH药物筛选模型的构建方法具体为：

4.根据权利要求3所述的3D...

【技术特征摘要】

1.一种3d细胞nash药物筛选模型，其特征在于，采用肝实质细胞l02和肝星状细胞lx2进行共培养并使用棕榈酸和油酸制备的诱导液进行诱导构建得到；

2.根据权利要求1所述的3d细胞nash药物筛选模型，其特征在于，所述诱导液中，棕榈酸与水和无水乙醇的比例为5.25～17mg∶0.5ml∶0.5ml；棕榈酸和油酸的质量比为1∶2～2∶1；且氢氧化钠溶液与水的体积比为1∶25；bsa溶液与水的体积比为18∶1。

3.根据权利要求1所述的3d细胞nash药物筛选模型，其特征在于，所述3d细胞nash药物筛选模型的构建方法具体为：

4.根据权利要求3所述的3d细胞nash药物筛选模型，其特征在于，步骤s1中接种的细胞量为1000～5000个。<...

【专利技术属性】
技术研发人员：谭君，孙岩，祝连彩，徐敏轩，赵俊杰，王小欣，
申请(专利权)人：重庆第二师范学院，
类型：发明
国别省市：