一种用于递送免疫增强剂信使RNA的工程化囊泡及其制备方法与应用技术

技术编号:43453804 阅读:32 留言:0更新日期:2024-11-27 12:55
本发明专利技术属于基因药物递送技术领域,具体涉及一种用于用于递送免疫增强剂信使RNA的工程化囊泡及其制备方法与应用;通过细胞外囊泡在靶向肝癌细胞递送编码人源T细胞共刺激受体OX40配体的信使RNA,进一步优化以提高负载和递送效率,并在细胞及动物水平靶向肝癌细胞表达人源T细胞共刺激受体OX40配体,同时激活周围T细胞,增强肿瘤细胞杀伤效应;本发明专利技术利用RNA结合蛋白LA7e与相关元件Box C/D的相互作用将编码人源T细胞共刺激受体OX40配体的信使RNA进入工程化细胞外囊泡;同时LAMP2b跨膜蛋白外侧锚定的HN3靶向肽促进肝癌细胞摄取工程化细胞外囊泡,进而表达人源T细胞共刺激受体OX40配体,并在细胞和动物水平刺激肿瘤侵润淋巴细胞的活化以及肝癌肿瘤细胞的清除。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因药物递送,具体涉及一种用于用于递送免疫增强剂信使rna的工程化囊泡及其制备方法与应用。


技术介绍

1、中国是一个肝癌大国,肝癌恶性程度高,进展迅速,预后差,患者5年生存率低,严重威胁着我国人民的生命和健康。多数肝癌患者对化疗不敏感,单一靶向治疗获益有限。

2、肝癌组织中存在大量的具有肿瘤组织特异性的肿瘤浸润淋巴细胞(tumorinfiltrating lymphocytes,tils),但是肿瘤微环境中持续的抗原刺激、免疫抑制细胞和免疫检查点会明显减弱t细胞的效应功能,这使得新兴的免疫疗法使用受限。其中,包括免疫检查点抑制(icis)疗法,如pd-1/pd-l1和ctla-4单抗等,仅可以使部分患者获益。因此,亟需开发新型有效的治疗方法。

3、信使rna(mrna),能够翻译产生功能蛋白,包括肿瘤抗原和肿瘤细胞/肿瘤微环境(tme)中产生的免疫相关因子,能够触发宿主的免疫反应,可以直接控制肿瘤进展或触发和加强免疫反应,是极具前景的新型基因疗法,但缺乏安全且高效的递送载体,临床应用受限。

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【技术保护点】

1.一种用于递送免疫增强剂信使RNA的工程化囊泡,其特征在于,所述工程化囊泡包括脂质双分子层和编码人源T细胞共刺激受体OX40配体的信使RNA;所述编码人源T细胞共刺激受体OX40配体的信使RNA通过LAMP2b跨膜蛋白与LA7e RNA结合蛋白融合蛋白与所述脂质双分子层连接。

2.根据权利要求1所述的一种用于递送免疫增强剂信使RNA的工程化囊泡,其特征在于,信使RNA编码的基因还包括AcGFP荧光报告基因。

3.根据权利要求1所述的一种用于递送免疫增强剂信使RNA的工程化囊泡,其特征在于,信使RNA还通过Tat结合蛋白进入囊泡。

4.根据权利要求1所...

【技术特征摘要】

1.一种用于递送免疫增强剂信使rna的工程化囊泡,其特征在于,所述工程化囊泡包括脂质双分子层和编码人源t细胞共刺激受体ox40配体的信使rna;所述编码人源t细胞共刺激受体ox40配体的信使rna通过lamp2b跨膜蛋白与la7e rna结合蛋白融合蛋白与所述脂质双分子层连接。

2.根据权利要求1所述的一种用于递送免疫增强剂信使rna的工程化囊泡,其特征在于,信使rna编码的基因还包括acgfp荧光报告基因。

3.根据权利要求1所述的一种用于递送免疫增强剂信使rna的工程化囊泡,其特征在于,信使rna还通过tat结合蛋白进入囊泡。

4.根据权利要求1所述的一种用于递送免疫增强剂信使rna的工程化囊泡,其特征在于,所述工程化囊泡由转染了重组表达载体的工程化细胞经表达和分离得到,所述重组表达载体包括第一重组质粒和第二重组质粒;所述第一重组质粒包括表达靶向肝癌细胞的靶向肽-跨膜蛋白-r...

【专利技术属性】
技术研发人员:何聪邵光鑫恽骁
申请(专利权)人:江苏第二师范学院
类型:发明
国别省市:

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