具有以L-谷氨酸为底物的丙二酰辅酶A合成路径的基因重组工程菌株及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种具有以L‑谷氨酸为底物的丙二酰辅酶A合成路径的基因重组工程菌株及其应用，涉及生物工程技术领域。本发明专利技术通过将具有2‑氧代戊二酸加氧酶基因表达系统、3‑羟基‑L‑谷氨酸醛缩酶基因表达系统、丙二酰辅酶A还原酶或CoA乙酰化醛脱氢酶基因表达系统的重组表达载体转染至底盘菌株感受态细胞中，可实现2‑氧代戊二酸加氧酶、3‑羟基‑L‑谷氨酸醛缩酶和丙二酰辅酶A还原酶的共表达，进而在转化细胞中实现以L‑谷氨酸为底物经生物合成得到丙二酰辅酶A的合成路径。使用上述重组表达载体构建得到的耶氏解脂酵母工程菌株，经验证可显著提高耶氏解脂酵母工程菌株中以丙二酰辅酶A为生物合成中间体的高值化合物的产量。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物工程，尤其是涉及一种具有以l-谷氨酸为底物的丙二酰辅酶a合成路径的基因重组工程菌株及其应用。

技术介绍

1、丙二酰辅酶a(malonyl-coa)是细胞代谢中的一个必要中间分子，作为各种化合物的生物合成的重要前体。

2、图1为丙二酰辅酶a作为合成前体可生物合成的各种化合物。

3、丙二酰辅酶a的作用跨越多个合成途径，在脂肪酸(脂质、油化学品、多不饱和脂肪酸)、多酮类(黄酮类化合物)和药用化合物(抗生素、大麻素)等方面起着关键作用。丙二酰辅酶a作为脂肪酸生物合成中的起始和延长分子，它可以调节脂肪酸的合成和分解，从而影响能量平衡和细胞功能，但其作用不仅限于代谢，在医学方面，它与人体胰岛素敏感性、心肌能量代谢和癌症进展相关的信号通路都扮演着至关重要的作用。

4、自然界的生物体中存在两种经典的丙二酰辅酶a途径，大多数生物体使用的是pdh-acc标准途径：丙酮酸氧化脱羧为乙酰辅酶a，生成的乙酰辅酶a再羧化形成丙二酰辅酶a。但乙酰辅酶a羧化酶在细菌中由四个不同的亚基组成，在高等生物中则由单个多肽链组成，分子量比较大，本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体的骨架载体是pYLXP’或pUrlp，且包括以下可操作性相连的元件：

2.根据权利要求1所述的重组表达载体，其特征在于，所述(c)丙二酰辅酶A还原酶基因表达系统可替换为：

3.根据权利要求1或2任一项所述的重组表达载体，其特征在于，所述2-氧代戊二酸加氧酶表达基因为IboH，所述IboH的基因序列如SEQ ID NO.1所示；

4.一种具有以L-谷氨酸为底物的丙二酰辅酶A合成路径的基因重组工程菌株，其特征在于，所述重组工程菌株含有权利要求1～3任一项所述的重组表达载体；

5.根据权利要求4所...

【技术特征摘要】

1.一种重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体的骨架载体是pylxp’或purlp，且包括以下可操作性相连的元件：

2.根据权利要求1所述的重组表达载体，其特征在于，所述(c)丙二酰辅酶a还原酶基因表达系统可替换为：

3.根据权利要求1或2任一项所述的重组表达载体，其特征在于，所述2-氧代戊二酸加氧酶表达基因为iboh，所述iboh的基因序列如seq id no.1所示；

4.一种具有以l-谷氨酸为底物的丙二酰辅酶a合成路径的基因重组工程菌株，其特征在于，所述重组工程菌株含有权利要求1～3任一项所述的重组表达载体；

5.根据权利要求4所述重组工程菌株，其特征在于，所述以l-谷氨酸为底物的丙二酰辅酶a合成路径包括：<...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐鹏，洪宇翔，吴梓钊，王金鹏，
申请(专利权)人：广东以色列理工学院，
类型：发明
国别省市：