【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于植物组织培养，具体涉及一种用于云南沉香组织培养的培养基组合及其应用和云南沉香组织培养的方法。
技术介绍
1、沉香是瑞香科（ thymelaeaceae）沉香属（ aquilaria）的植物在受到伤害后产生的含有树脂的木材，是传统的名贵药材和天然香料。沉香属植物在全球约有15种，中国有2种：云南沉香（ aquilaria yunnanensiss. c. huang）和白木香（ aquilaria sinensis(lour.)spreng.）。云南沉香树高3~8米，树干通直，分枝较少，生态适应性较好，其茎皮可作为造纸原料及人造棉原料，药用能温中理气、健脾、益肾等（《中国植物志》，1999，52(1)：290~292.），是一种高价值的珍贵树种，可以形成沉香，且气味浓香持久，是沉香中的佳品。
2、云南沉香主要产于云南西双版纳及临沧地区等热带亚热带地区，随着白木香资源的逐渐枯竭，对云南沉香资源的开发利用逐渐被重视（苏娟等.云南沉香和白木香的木材结构比较解剖学研究，热带农业科学，2016，36(4):30~34.）。目前，云南沉香的繁殖方式以种子育苗为主，种子的存活期很短不能久藏，需要即采即播，繁殖效率低，且种子育苗较易发生变异，难以维持优良种质。开展云南沉香的组织培养不受外界环境影响，可提高云南沉香的增殖速度，且保持性状稳定，也是解决优良名贵品种供需矛盾的一种快速有效的方法，
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种用于云南沉香组织培养的培养基组合及其应用和云南沉香组织培养的方法，本专利技术的培养基组合和方法能够简化培养程序、节约培养成本，实现云南沉香的快速大量繁殖。
2、本专利技术提供了一种用于云南沉香组织培养的培养基组合，包括诱导培养基、壮苗培养基和生根培养基；
3、所述诱导培养基以ms培养基为基础培养基，还包括以下浓度的组分：25.0~35.0g/l的蔗糖、0.05~0.2mg/l的iba、0.05~0.2mg/l的naa、2.5~3.5mg/l的6-ba和0.03~0.06mg/l的ga3和6.8~7.3g/l的琼脂；
4、所述壮苗培养基以ms培养基为基础培养基，还包括以下浓度的组分：25.0~35.0g/l的蔗糖、1.5~2.5mg/l的naa、0.3~0.7mg/l的6-ba、0.5~1.5g/l的活性炭和6.8~8.0g/l的琼脂；
5、所述生根培养基以1/2ms培养基为基础培养基，还包括以下浓度的组分：10.0~20.0g/l的蔗糖，0.3~0.7mg/l的naa和6.8~8.0g/l的琼脂。
6、优选的，所述诱导培养基以ms培养基为基础培养基，还包括以下浓度的组分：30.0g/l的蔗糖、0.1mg/l的iba、0.1mg/l的naa、3.0mg/l的6-ba和0.05mg/l的ga3和7.0g/l的琼脂；
7、所述壮苗培养基以ms培养基为基础培养基，还包括以下浓度的组分：30.0g/l的蔗糖、2.0mg/l的naa、0.5mg/l的6-ba、1.0g/l的活性炭和7.0g/l的琼脂；
8、所述生根培养基以1/2ms培养基为基础培养基，还包括以下浓度的组分：15.0g/l的蔗糖，0.5mg/l的naa和7.0g/l的琼脂。
9、本专利技术还提供了上述技术方案所述的培养基组合在云南沉香组织培养中的应用。
10、本专利技术还提供了一种基于上述技术方案所述的培养基组合的云南沉香组织培养的方法，包括以下步骤：
11、将经抗褐化剂处理的外植体接种到诱导培养基上进行诱导培养，得到丛生芽苗；
12、将所述丛生芽苗接种到壮苗培养基上进行壮苗培养后，转接到生根培养基上进行生根培养，得到云南沉香组培苗；
13、所述抗褐化剂包括pvp；所述外植体包括云南沉香的的带腋芽幼嫩茎段。
14、优选的，所述经抗褐化剂处理的外植体的制备方法包括：将外植体在0.3wt.%~0.6wt.%的pvp溶液中浸泡10~20min。
15、优选的，将外植体在pvp溶液中浸泡后，还包括：在0.3wt.%~0.6wt.%的pvp溶液中分别切除外植体两端各2mm的茎段。
16、优选的，所述生根培养的时间以丛生芽苗高为31~36mm为止。
17、优选的，所述诱导培养、壮苗培养和生根培养的条件均为：温度为23~25℃，光周期为16h光照/8h黑暗，光照强度为3000lx。
18、优选的，所述诱导培养的时间为40~50d；所述壮苗培养的时间为35~45d；所述生根培养的时间为40~50d。
19、本专利技术还提供了上述技术方案所述方法在云南沉香种植中的应用。
20、有益效果：
21、本专利技术提供了一种用于云南沉香组织培养的培养基组合，包括丛生芽诱导培养基、壮苗培养基和生根培养基；本专利技术提供的培养基组合中的植物生长调节剂和其他组分皆为价廉易得，容易配制，且操作简单效率高；本专利技术通过使用筛选出的培养基组合物经过诱导愈伤组织和丛生芽、壮苗和生根三个阶段可培养出大量健康的可移栽云南沉香组培苗，简化了培养程序且节约了培养成本。
22、本专利技术还提供了一种云南沉香的组织培养方法，本专利技术以云南沉香的带腋芽幼嫩茎段作为外植体，以pvp作为抗褐化剂对外植体进行处理，克服了云南沉香外植体易褐化、愈伤组织不易分化的局限性，通过外植体类型大小、接种方式、植物激素使用种类及浓度组合等多个方面研究愈伤组织及丛生芽的诱导和分化，获得组织培养的优化条件，从而在较短时间内可以获得大量可移栽的云南沉香幼苗，对解决珍稀树种在短期内难以快速大量繁殖的问题，满足市场需求，提高经济效益有着重要意义。
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1.一种用于云南沉香组织培养的培养基组合，其特征在于，包括诱导培养基、壮苗培养基和生根培养基；
2.根据权利要求1所述的培养基组合，其特征在于，所述诱导培养基以MS培养基为基础培养基，还包括以下浓度的组分：30.0g/L的蔗糖、0.1mg/L的IBA、0.1mg/L的NAA、3.0mg/L的6-BA和0.05mg/L的GA3和7.0g/L的琼脂；
3.权利要求1或2所述的培养基组合在云南沉香组织培养中的应用。
4.一种基于权利要求1或2所述的培养基组合的云南沉香组织培养的方法，其特征在于，包括以下步骤：
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述经抗褐化剂处理的外植体的制备方法包括：将外植体在0.3wt.%~0.6wt.%的PVP溶液中浸泡10~20min。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，将外植体在PVP溶液中浸泡后，还包括：在0.3wt.%~0.6wt.%的PVP溶液中分别切除外植体两端各2mm的茎段。
7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述生根培养的时间以丛生芽苗高为31~36mm
8.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述诱导培养、壮苗培养和生根培养的条件均为：温度为23~25℃，光周期为16h光照/8h黑暗，光照强度为3000Lx。
9.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述诱导培养的时间为40~50d；所述壮苗培养的时间为35~45d；所述生根培养的时间为40~50d。
10.权利要求4~9任意一项所述方法在云南沉香种植中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种用于云南沉香组织培养的培养基组合，其特征在于，包括诱导培养基、壮苗培养基和生根培养基；
2.根据权利要求1所述的培养基组合，其特征在于，所述诱导培养基以ms培养基为基础培养基，还包括以下浓度的组分：30.0g/l的蔗糖、0.1mg/l的iba、0.1mg/l的naa、3.0mg/l的6-ba和0.05mg/l的ga3和7.0g/l的琼脂；
3.权利要求1或2所述的培养基组合在云南沉香组织培养中的应用。
4.一种基于权利要求1或2所述的培养基组合的云南沉香组织培养的方法，其特征在于，包括以下步骤：
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述经抗褐化剂处理的外植体的制备方法包括：将外植体在0.3wt.%~0.6wt.%的pvp溶液中浸泡10...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈倩，王广艳，孙旭东，罗吉凤，杨珺，
申请(专利权)人：中国科学院昆明植物研究所，
类型：发明
国别省市：
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