一种利用量子点荧光免疫分析法检测甲基睾酮的方法技术

技术编号:43391390 阅读:25 留言:0更新日期:2024-11-19 18:05
本发明专利技术涉及生物医药检测技术领域,特别是涉及一种利用量子点荧光免疫分析法检测甲基睾酮的方法。包括:将甲基睾酮‑卵清蛋白溶液添加到酶标板中孵育,再加入封闭液孵育,得到封闭后的酶标板;将样品和甲基睾酮单克隆抗体溶液加入到封闭后的酶标板中进行孵育反应,再加入偶联物溶液进行孵育反应,洗涤和拍干后加入缓冲液,在450nm下测定荧光强度值,计算抑制率F/F0,代入以下公式,计算样品中甲基睾酮的含量。本发明专利技术以ZnCdSe/ZnS量子点与羊抗鼠IgG结合作为新型荧光探针,建立了荧光免疫分析法(icFLISA),用于动物饲料中甲基睾酮残留的定量检测。与传统的间接竞争酶联免疫吸附法相比更灵敏。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医药检测,特别是涉及一种利用量子点荧光免疫分析法检测甲基睾酮的方法


技术介绍

1、甲基睾丸酮(methyltestosterone,mt),又名甲睾酮、甲基睾酮和甲基睾丸素,是一种合成类固醇,属于蛋白同化激素,具有雄性和蛋白同化双重作用。在水产养殖业中,一直作为苗种培育和性别控制等方面的特效药物,但其在水产品中的残留严重威胁人体健康。

2、大量实验表明,mt代谢时间长,对人类的危害是慢性、远期和累积性的。其危害主要表现在干扰体内自然激素的平衡、使正常人的生理功能发生紊乱,严重时还会致新生儿畸形,影响儿童的正常生长发育。欧盟95/22/ec规定禁止使用雄性激素兽药;美国规定其同类的丙酸睾酮在肌肉中的最高残留限量(mrl)为0.64μg/kg,中国农业农村部235号公告《动物性食品中兽药最高残留限量》规定mt为禁止使用兽药,在所有食用动物的所有可食组织中不得检出。

3、目前国内外水产品中激素残留分析方法主要有高效液相色谱法、液相色谱-质谱测定法和酶联免疫法等。这些方法准确性高、灵敏度高、重复性好,然而需要较长的实验时本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种利用量子点荧光免疫分析法检测甲基睾酮的方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤1)甲基睾酮-卵清蛋白溶液的浓度为2μg/mL,每孔添加量为100μL。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤1)孵育的条件包括:温度为37℃,时间为2h。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤2)样品的每孔添加量为100μL;

5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤2)甲基睾酮单克隆抗体溶液中甲基睾酮单克隆抗体的重链可变区氨基酸序列如SEQ ID No.1所示,轻链可变区...

【技术特征摘要】

1.一种利用量子点荧光免疫分析法检测甲基睾酮的方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤1)甲基睾酮-卵清蛋白溶液的浓度为2μg/ml,每孔添加量为100μl。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤1)孵育的条件包括:温度为37℃,时间为2h。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤2)样品的每孔添加量为100μl;

5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤2)甲基睾酮单克隆抗体溶液中甲基睾酮单克隆抗体的重链可变区氨基酸序列如seq id no.1所示,轻链可变区氨基酸序<...

【专利技术属性】
技术研发人员:陈玉梅王爱萍张改平周景明刘恩平吴思璇
申请(专利权)人:龙湖现代免疫实验室
类型:发明
国别省市:

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