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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物,具体涉及一种α-螺旋结构抗菌肽18n1及其制备方法和应用。
技术介绍
1、随着抗生素的滥用,许多致病菌的抗药性大大增强,越来越多的耐药细菌出现,成为全球医疗卫生界的严重问题,并对人类公共健康造成很大威胁。而抗菌多肽的发现给这一问题带来了新的希望。天然抗菌肽是生物防御系统中产生的具有抗菌活性的小分子多肽,属于生物体的天然防御系统。与传统抗生素的主要针对病原体的某些特定细胞内靶点不同,大多数小分子的阳离子抗菌肽通常首先通过静电相互作用,作用于细菌细胞膜,然后破坏细胞膜或干扰酶、蛋白质、细胞壁或核酸的合成来抑制微生物。因此,许多抗菌肽对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和真菌均表现出广谱杀菌活性,包括一些耐多药菌。然而与传统抗生素相比,现有的大多数天然抗菌肽的杀菌活力并不高,但生产成本高、合成难度大,这大大限制了抗菌肽在实际生产中的应用。
技术实现思路
1、本专利技术旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此,本专利技术提出一种抗菌肽,能够对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和白色念珠菌具有良好的抑菌活性。
2、本专利技术还提出一种上述抗菌肽的制备方法。
3、本专利技术还提出上述抗菌肽的应用。
4、本专利技术还提出了一种产品。
5、根据本专利技术的一个方面,提出了一种抗菌肽,所述抗菌肽选自以下(1)-(2)中的任一种:
6、(1)具有如seq id no:1氨基酸序列的多肽;
7、(2)将如
8、在本专利技术的一些实施方式中,所述菌包括细菌和真菌。
9、在本专利技术的一些实施方式中,所述细菌包括金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌。
10、在本专利技术的一些实施方式中,所述真菌包括白色念珠菌。
11、在本专利技术的一些实施方式中,所述抗菌肽的结构为α-螺旋结构。
12、本专利技术方案的多肽通过选择疏水性氨基酸、碱性氨基酸及调整、替换特定氨基酸在多肽螺旋轮上的位点,使得最终螺旋轮投影图上疏水性氨基酸分布在一侧,碱性氨基酸分布在另一侧,通过色氨酸调整多肽的疏水性,增加精氨酸以提供靶向细菌膜的正电荷,以提高抗菌效果,通过色氨酸与赖氨酸的协同作用来提高多肽对白色念珠菌的靶向作用,最终确定得到本申请方案的抗菌肽序列。
13、根据本专利技术的第二方面,提出了生物材料,所述生物材料为1)至4)中的任一种:
14、1)、编码上述抗菌肽的核酸分子;
15、2)、含有1)所述核酸分子的表达盒;
16、3)、含有1)所述核酸分子或2)所述表达盒的重组载体;
17、4)、含有1)所述核酸分子、2)所述表达盒或3)所述重组载体的重组细胞。
18、本专利技术方案的第二方面提出了一种上述抗菌肽的制备方法,所述制备方法包括以下步骤:以固相合成树脂为起始原料,采用固相合成方法制备得到所述抗菌肽。
19、在本专利技术的一些实施方式中,所述抗菌肽还可以通过人工合成。
20、在本专利技术的一些实施方式中,所述抗菌肽的制备从c端到n端逐一进行。
21、在本专利技术的一些实施方式中,所述固相合成树脂包括rink树脂。
22、在本专利技术的一些实施方式中,还包括将所述固相合成树脂浸泡于dmf溶液中使其溶胀的步骤。
23、在本专利技术的一些实施方式中,所述固相合成树脂浸泡于dmf溶液的时间为30-50min。
24、在本专利技术的一些实施方式中,所述采用固相合成方法包括将含有保护基团的氨基酸接到树脂上,依次进行冲洗、脱保护、耦合的步骤,至最后一个氨基酸接枝,得到多肽链;将所述多肽链依次进行脱保护、洗涤后,切割得到所述抗菌肽。
25、在本专利技术的一些实施方式中,所述保护基团包括fmoc-。
26、在本专利技术的一些实施方式中,将含有保护基团的氨基酸接到树脂上,使用的活化剂包括0.3-0.5m的hbtu及1-3m的diea。
27、在本专利技术的一些实施方式中,所述冲洗采用的试剂包括dmf。
28、在本专利技术的一些实施方式中,所述脱保护包括加入质量分数为15%-25%的哌啶脱保护液,反应后,脱除液相,清洗树脂的步骤。
29、在本专利技术的一些实施方式中,所述清洗树脂采用的试剂包括dmf。
30、在本专利技术的一些实施方式中,所述耦合包括脱保护的树脂溶解后,加入hbtu和氨基酸混合液进行反应的步骤。
31、在本专利技术的一些实施方式中,所述hbtu的浓度为0.3-0.5m。
32、在本专利技术的一些实施方式中,所述氨基酸混合液的制备包括:通入氮气活化氨基酸溶液后,加入浓度为1-3m的diea溶液反应得到。
33、在本专利技术的一些实施方式中,所述洗涤采用的洗涤液包括dmf、甲醇和二氯甲烷中的至少一种。
34、在本专利技术的一些实施方式中,所述切割采用切割液。
35、在本专利技术的一些实施方式中,所述切割液包括以下组分:tfa、tis、edt,茴香硫醚、苯酚。
36、在本专利技术的一些实施方式中,还包括将所述抗菌肽采用乙醚进行洗涤的步骤。
37、在本专利技术的一些实施方式中,所述乙醚的温度为0-8℃。
38、根据本专利技术的第四方面,提出了上述抗菌肽或生物材料在制备抗菌产品中的应用。
39、在本专利技术的一些实施方式中,所述菌包括细菌和真菌。
40、在本专利技术的一些实施方式中,所述细菌包括金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌。
41、在本专利技术的一些实施方式中,所述真菌包括白色念珠菌。
42、在本专利技术的一些实施方式中,所述产品包括药物、饲料添加剂、防腐剂或消杀剂。
43、根据本专利技术的第五方面,提出了一种产品,包括上述抗菌肽。
44、在本专利技术的一些实施方式中,所述产品包括药物、饲料添加剂、防腐剂或消杀剂。
45、在本专利技术的一些实施方式中,所述产品具有抗菌作用。
46、在本专利技术的一些实施方式中,所述菌包括细菌和真菌。
47、在本专利技术的一些实施方式中,所述细菌包括金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌。
48、在本专利技术的一些实施方式中,所述真菌包括白色念珠菌。
49、在本专利技术的一些实施方式中,所述药物还包括药用载体。
50、在本专利技术的一些实施方式中,所述药用载体为药学领域常规的药物载体。
51、在本专利技术的一些实施方式中,所述药用载体包括稀释剂、赋形剂、填充剂、黏合剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂、甜味剂和香味剂中的至少一种。
52、在本专利技术的一些实施方式中,所述赋形剂包括水。
53、在本专利技术的一些实施方式中,所述填充本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种抗菌肽,其特征在于,所述抗菌肽选自以下(1)-(2)中的任一种:
2.生物材料,所述生物材料为1)至4)中的任一种:
3.一种如权利要求1所述的抗菌肽的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括以下步骤:以固相合成树脂为起始原料,采用固相合成方法制备得到所述抗菌肽。
4.权利要求1所述的抗菌肽或权利要求2所述的生物材料在制备抗菌产品中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述菌包括细菌和真菌。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述细菌包括金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌。
7.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述真菌包括白色念珠菌。
8.据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述产品包括药物、饲料添加剂、防腐剂或消杀剂。
9.一种产品,其特征在于,包括如权利要求1所述的抗菌肽;
10.根据权利要求9所述的产品,其特征在于,所述药物的剂型为固体、半固体或液体的形式,可以为水溶液、非水溶液或混悬液;
【技术特征摘要】
1.一种抗菌肽,其特征在于,所述抗菌肽选自以下(1)-(2)中的任一种:
2.生物材料,所述生物材料为1)至4)中的任一种:
3.一种如权利要求1所述的抗菌肽的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括以下步骤:以固相合成树脂为起始原料,采用固相合成方法制备得到所述抗菌肽。
4.权利要求1所述的抗菌肽或权利要求2所述的生物材料在制备抗菌产品中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述菌包括细菌和真菌。
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