一种接头组合物和小RNA文库及其构建方法技术

本发明专利技术公开了一种接头组合物和小RNA文库及其构建方法，涉及生物测序领域，该接头组合物包括3’接头和5’接头，3’接头和5’接头分别具有回文结构，末端均具有凸出的随机碱基，5’接头采用DNA和RNA的复合设计，这种全新的结构使得3’接头和5’接头与目的核酸能够实现同时连接，有效缩短文库构建的反应时间，仅需要30min即可完成文库连接反应，降低RNA降解的风险；此外，这种接头结构能够有效的避免接头自连接，可提高构建文库的纯度，将其应用于小RNA文库的构建，可基于超微量样本获得高纯度和高产量的小RNA文库。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物测序领域，具体而言，涉及一种接头组合物和小rna文库及其构建方法。

技术介绍

1、小rna是生物体内的一大类调控分子，包括micro rna、sirna、pirna、snrna、snorna和rsrna等，它们在生物体内发挥着重要的调控作用。近些年已有一些研究成功地将小rna的谱系作为特定疾病诊断的标志物。未来小rna的检测将会在疾病的早期诊断，分型和个体化检测治疗中得到广泛地应用。常用的小rna定量检测技术包括深度测序技术、芯片技术和qrt-pcr技术。后两者需要合成特异性探针，因此只能检测已知种类的小rna。高通量测序技术因其具有通量高、灵敏度高、无需任何预先的序列信息以及二级结构信息、可以发现新的小rna分子等优点，在小rna研究领域得到广泛应用。对于小rna深度测序的文库构建方法主要是两步接头连接反转录法。该方法适用于包括打断的长转录本rna在内的任何适合连接反应的rna深度测序文库的构建，例如，小rna测序、clip测序、rip测序、gro测序等。

2、现有小rna或rna片段的文库构建的步骤，首先需要在小rna 3本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种接头组合物，其特征在于，其包括：3’接头和5’接头；

2.根据权利要求1所述的接头组合物，其特征在于，所述第一随机序列位于所述5’接头序列的5’端；

3.根据权利要求1所述的接头组合物，其特征在于，所述RNA碱基部分的长度为2~6nt。

4.根据权利要求1所述的接头组合物，其特征在于，所述第一序列的长度为3~20nt；

5.一种试剂盒，其特征在于，其包括：权利要求1~4任一项所述的接头组合物。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括：RNA双链连接酶；

7.一种小RNA文库构建方法，其特...

【技术特征摘要】

1.一种接头组合物，其特征在于，其包括：3’接头和5’接头；

2.根据权利要求1所述的接头组合物，其特征在于，所述第一随机序列位于所述5’接头序列的5’端；

3.根据权利要求1所述的接头组合物，其特征在于，所述rna碱基部分的长度为2~6nt。

4.根据权利要求1所述的接头组合物，其特征在于，所述第一序列的长度为3~20nt；

5.一种试剂盒，其特征在于，其包括：权利要求1~4任一项所述的接头组合物。

6...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘军，章琼璐，朱志虹，
申请(专利权)人：新生命基因科技杭州有限公司，
类型：发明
国别省市：