【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物分离纯化。具体涉及一种表面蛋白印迹聚合物的制备及应用。特别是一种依靠酶级联反应的表面蛋白印迹聚合物的制备方法及在复杂生物样品中蛋白质的分离纯化方面的应用。
技术介绍
1、分子印迹技术(mips)是抗体与受体的关系，它具有定制的结合位点，与模板分子在形状，大小，以及官能团上互补。由于其独特的结构可预见性，识别的特异性，和通用性等特点，mips在各个领域内得到了广泛的应用。虽然分子印迹技术被广泛的应用，该技术被证明对于低分子量的分子量在1500以内的小分子蛋白特别有效，但是对于选择性识别蛋白质，病毒等大分子物质仍然具有很大的挑战，主要存在的难题是模板去除困难，印迹因子低下。
2、为了解决上述问题，研究者提出了表位印迹、表面印迹等印迹技术。其中表位印迹以大分子表面的某个肽段为模板进行印迹。然而，表位的寻找难度极大，且合成困难。不同的是，表面印迹技术以整个分子为模板，在纳米载体的表面形成薄的印迹聚合物层，可减少模板分子的传质阻力，有助于提高洗脱效率和印迹空腔的可及性。因此，表面印迹技术受到研究者的极大关注。
...【技术保护点】
1.一种依靠酶级联反应的表面蛋白印迹聚合物的制备方法，其特征是，包括如下步骤：
2.如权利要求1所述的依靠酶级联反应的表面蛋白印迹聚合物的制备方法，其特征是，纳米粒子包括SiO2、Fe3O4、Fe3O4-Cu、MOF、COF、Au、CeO2或Ag。
3.如权利要求1所述的依靠酶级联反应的表面蛋白印迹聚合物的制备方法，其特征是，步骤(1)中3-氨丙基三乙氧基硅烷浓度为0.01-0.20M。
4.如权利要求1所述的依靠酶级联反应的表面蛋白印迹聚合物的制备方法，其特征是，步骤(2)中氨基化纳米粒子分散在四氢呋喃溶液中粒子浓度为0.01-0...
【技术特征摘要】
1.一种依靠酶级联反应的表面蛋白印迹聚合物的制备方法，其特征是，包括如下步骤：
2.如权利要求1所述的依靠酶级联反应的表面蛋白印迹聚合物的制备方法，其特征是，纳米粒子包括sio2、fe3o4、fe3o4-cu、mof、cof、au、ceo2或ag。
3.如权利要求1所述的依靠酶级联反应的表面蛋白印迹聚合物的制备方法，其特征是，步骤(1)中3-氨丙基三乙氧基硅烷浓度为0.01-0.20m。
4.如权利要求1所述的依靠酶级联反应的表面蛋白印迹聚合物的制备方法，其特征是，步骤(2)中氨基化纳米粒子分散在四氢呋喃溶液中粒子浓度为0.01-0.10mg ml-1，加入丁二酸酐浓度为0.01-0.20m。
5.如权利要求1所述的依靠酶级联反应的表面蛋白印迹聚合物的制备方法，其特征是，步骤(3)中将洗涤后的羧基化纳米粒子分散在磷酸盐缓冲液中粒子浓度为0.01-0.10mgml-1，按照1.5：1的摩尔比加入葡萄糖氧化酶(gox)和辣根过氧化物酶(hrp)，1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺浓度为0.05-1.0m。
6.如权利要求1所述的依靠酶级联反应的表面蛋白印迹聚合物的制备方法，其特征是，步骤(4)中...
【专利技术属性】
技术研发人员：张拥军，王亚斐，张岩，
申请(专利权)人：沧州市天津工业大学研究院，
类型：发明
国别省市：
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