【技术实现步骤摘要】
本专利技术属中药化学成分质量检测领域，尤其涉及一种清瘟护肺颗粒指纹图谱的检测方法。
技术介绍
1、清瘟护肺颗粒由金银花、连翘、浙贝母、大青叶、淡竹叶、桔梗、党参、炒白术、茯苓、玄参、麦冬、苦杏仁、茵陈、防风、紫苏叶、甘草共16味中药组成，具有疏解风热，清肺止咳，固护脾胃之功效，适用于新型冠状病毒感染的轻症以及冬春季急性呼吸道感染。
2、本申请人针对该产品布局两件相关专利申请，其具体为cn111097021a公开了治疗新冠肺炎轻症、疑似者和急性呼吸道感染中药组合物，该中药组合物是由下述重量份中药原材料制成：金银花10-20g、连翘10-20g、大青叶10-20g、玄参10-20g、炒苦杏仁6-15g、浙贝母10-20g、桔梗6-15g、紫苏叶6-15g、防风6-15g、麸炒白术10-20g、茯苓10-20g、绵茵陈10-20g、党参10-20g、淡竹叶6-15g、麦冬10-20g、生甘草4-10g；炒苦杏仁制备方法为将苦杏仁进行炒制；麸炒白术的制法是将生白术进行加热再加入麦麸炒制；取上述重量份中药原材料，水煎30分钟，取汁400ml，即可。该药具有表里同治、清补兼施、既病防变的特点，对于治疗冬春季呼吸道感染性疾病，疗效确切，患者服用药物前后改善的症状依次为流涕、发热、咳嗽、咽干咽痛、咳痰、饮食差、气短的功效作用。
3、其公开号cn202211478410.8记载一种清瘟护肺颗粒的超高效液相-质谱检测方法，采用超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱法uhplc-qexactivefocusms/ms技
4、但因清瘟护肺颗粒为中药复方制剂，该中药组方中含有的中药的药味繁多，其所含有的中药有效成分十分复杂。目前现有的内控标准中仅有薄层鉴别的方法，但由于薄层鉴别是定性鉴别，其不能充分控制其中药复方内在质量。中药指纹图谱能够比较全面地反映中药化学成分的整体特性，是评价中药材真伪、优劣、质量一致性与稳定性的有效方法。将多指标成分定量法与指纹图谱相结合，能够同时提供中药材的定性和定量信息，是一种有效的中药材质量控制方法。
技术实现思路
1、本专利技术提供一种清瘟护肺颗粒指纹图谱的检测方法，该检测方法生成标准指纹图谱共确定了14个共有色谱峰，并鉴定其中7个色谱峰，分别包括新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、连翘酯苷a、3,5-o-二咖啡酰奎宁酸、4,5-o-二咖啡酰奎宁酸、安格洛苷指标成分。且本专利技术建立的指纹图谱检测方法，14批次的清瘟护肺颗粒进行测定，其相似度值≥0.943。本专利技术还建立新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、连翘酯苷a、3,5-o-二咖啡酰奎宁酸、4,5-o-二咖啡酰奎宁酸、安格洛苷7个指标指标成分的含量测定方法，其方法学结果可知，其精密度、稳定性、加样回收率良好，可用于对清瘟护肺颗粒中药组合物的内在质量检测和鉴别，在工业化大生产应用中，有良好的市场前景。
2、本专利技术专利申请的技术方案为：
3、一种清瘟护肺颗粒的指纹图谱检测方法，所述检测方法包括以下步骤：
4、⑴、供试品溶液的制备：称取本专利技术清瘟护肺颗粒，加入甲醇溶解，超声处理，冷却，摇匀，滤过蒸干，定容，过滤，取续滤液，即得；
5、⑵、对照品溶液的制备：称取新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、连翘酯苷a、3,5-o-二咖啡酰奎宁酸、4,5-咖啡酰奎宁酸、安格洛苷c对照品，在加入40～60％甲醇稀释后定容，即得；
6、⑶、色谱条件为：色谱柱为c18，流动相：0.1％甲酸水为a流动相，乙腈为b流动相；本专利技术采用梯度洗脱方法，洗脱顺序为：0～14min，6％～8％b；14～15min，8％～13％b；15～17min，13％～15％b；17～20min，15％～17％b；20～23min，17％～33％b；23～27min，33％b；27～31min，33％～98％b；流速0.2～0.6ml/min；柱温23～28℃，检测波长为220～270nm；
7、⑷、建立指纹图谱：将步骤⑴供试品溶液、步骤⑵对照品溶液，采用步骤⑶项下的色谱条件测定，按步骤⑶项下色谱条件进行检测，对多批次的清瘟护肺颗粒供试品溶液进样分析，将数据文件转换成“aia”格式，导入“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”，生成对照指纹图谱。
8、作为本专利技术的优选，所述检测方法步骤⑴所述超声频率40～60khz、超声功率280～320w、超声处理时间为20～40min。
9、作为本专利技术的优选，所述检测方法步骤⑵中甲醇的浓度为50％。
10、作为本专利技术的优选，所述检测方法步骤⑵中新绿原酸的浓度为：0.0467～0.280mg/ml、绿原酸的浓度为：0.0375～0.2250mg/ml、隐绿原酸的浓度为：0.0395～0.2370mg/ml、连翘酯苷a的浓度为：0.0448～0.2688mg/ml、3,5-o-二咖啡酰奎宁酸的浓度为：0.00506～0.03036mg/ml、4,5-咖啡酰奎宁酸的浓度为：0.00396～0.02376mg/ml、安格洛苷c的浓度为：0.00576～0.03456mg/ml。
11、作为本专利技术的优选，所述检测方法步骤⑵中新绿原酸的浓度为：0.2802mg/ml、绿原酸的浓度为：0.2250mg/ml、隐绿原酸的浓度为：0.2370mg/ml、连翘酯苷a的浓度为：0.1344mg/ml、3,5-o-二咖啡酰奎宁酸的浓度为：0.03036mg/ml、4,5-咖啡酰奎宁酸的浓度为：0.02376mg/ml、安格洛苷c的浓度为：0.03456mg/ml。
12、作为本专利技术的优选，所述检测方法步骤⑶色谱柱c18型号：agilent zorbaxeclipse plus，色谱柱规格为250mm×4.6mm,5μm。
13、作为本专利技术的优选，所述检测方法步骤⑶中色谱柱温为25℃，流速为0.3ml/min，检测波长为254nm。
14、所述多批次为10批以上。
15、作为本专利技术的优选，所述采用步骤⑶色谱条件进行检测清瘟护肺中药供试品溶液，将生成高效液相色谱峰与对照指纹图谱比较，计算其相似度在0.94～1.00。
16、作为本专利技术的优选，所述检测方法可用于清瘟护肺颗粒中药的质量检测及成分鉴定中应用。
17、为了进一步说明，本专利技术清瘟护肺颗粒指纹图谱的检测方法的创造性，现将本专利技术技术方案筛选的部分实验内容整理如下。...
【技术保护点】
1.一种清瘟护肺颗粒的指纹图谱检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：
2.如权利要求1所述检测方法，其特征在于，所述检测方法步骤⑴所述超声频率40~60kHz、超声功率280~320W、超声处理的时间20~40min。
3.如权利要求1所述检测方法，其特征在于，所述检测方法步骤⑵中甲醇的浓度为50%。
4.如权利要求1所述检测方法，其特征在于，所述检测方法步骤⑵中新绿原酸的浓度为： 0.0467～0.280mg/mL、绿原酸的浓度为：0.0375～0.2250mg/mL、隐绿原酸的浓度为：0.0395～0.2370mg/mL、连翘酯苷A 的浓度为：0.0448～0.2688mg/mL、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸的浓度为：0.00506～0.03036mg/mL、4,5-咖啡酰奎宁酸的浓度为：0.00396～0.02376mg/mL、安格洛苷C 的浓度为：0.00576～0.03456mg/mL。
5.如权利要求4所述检测方法，其特征在于，所述检测方法步骤⑵中新绿原酸的浓度为： 0.2802mg/mL、绿原酸的浓度为：0.2
6.如权利要求1所述检测方法，其特征在于，所述检测方法步骤⑶色谱柱C18型号：Agilent ZORBAX Eclipse Plus，色谱柱规格为250 mm×4. 6 mm, 5μm。
7.如权利要求1所述检测方法，其特征在于，所述检测方法步骤⑶中色谱柱温为25°C，流速为0.3 mL/min，检测波长为254 nm。
8.如权利要求1所述指纹图谱检测方法，其特征在于，所述采用步骤⑶色谱条件进行检测清瘟护肺中药供试品溶液，将生成高效液相色谱峰与对照指纹图谱比较，计算其相似度在0.94～1.00。
9.如权利要求1~8所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法可用于清瘟护肺颗粒中药的质量检测及成分鉴定中应用。
...【技术特征摘要】
1.一种清瘟护肺颗粒的指纹图谱检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：
2.如权利要求1所述检测方法，其特征在于，所述检测方法步骤⑴所述超声频率40~60khz、超声功率280~320w、超声处理的时间20~40min。
3.如权利要求1所述检测方法，其特征在于，所述检测方法步骤⑵中甲醇的浓度为50%。
4.如权利要求1所述检测方法，其特征在于，所述检测方法步骤⑵中新绿原酸的浓度为： 0.0467～0.280mg/ml、绿原酸的浓度为：0.0375～0.2250mg/ml、隐绿原酸的浓度为：0.0395～0.2370mg/ml、连翘酯苷a 的浓度为：0.0448～0.2688mg/ml、3,5-o-二咖啡酰奎宁酸的浓度为：0.00506～0.03036mg/ml、4,5-咖啡酰奎宁酸的浓度为：0.00396～0.02376mg/ml、安格洛苷c 的浓度为：0.00576～0.03456mg/ml。
5.如权利要求4所述检测方法，其特征在于，所述检测方法步骤⑵中新绿原酸的浓度为： 0.2802mg/...
【专利技术属性】
技术研发人员：张红，龙凯花，刘洋，李晔，王园，杨允，杨栓柱，曹利平，
申请(专利权)人：陕西省中医药研究院，
类型：发明
国别省市：
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