pH耐受性提高的内切葡聚糖酶突变体及其制备方法技术

本发明专利技术以地芽孢杆菌（Geobacillus sp. 70PC53）来源的内切葡聚糖酶作为原始酶，公开了3种pH耐受性提高的内切葡聚糖酶突变体，分别为V217L、A123S/I165V和A123G/I165L/V185S/V217C。本发明专利技术提供的内切葡聚糖酶突变体pH耐受性优于原始酶，在pH9.0的条件下，突变体相比原始酶的残留酶活可提高66%；本发明专利技术提供的内切葡聚糖酶突变体在pH3.0~11.0内的相对酶活均高于原始酶，能够在该条件下保持稳定高效的催化性能，工业应用前景较好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种内切葡聚糖酶突变体，尤其涉及一种ph耐受性提高的内切葡聚糖酶突变体，属于基因工程。

技术介绍

1、纤维素是自然界中分布最广、含量最多的一种多糖，是环境友好、可生物降解的天然有机高分子材料。纤维素及其衍生物广泛用于生物医药、食品、电子元件、新能源等诸多领域，其水解产物是酿酒工程、生产纸张和纺织品、生物燃料和化学品等的重要原料。作为植物细胞壁的主要结构成分，纤维素通常与半纤维素、果胶和木质素结合在一起，因此对植物源产品的质地影响很大。例如在食品加工业中，纤维素的存在会降低果汁的提取率和品质，对生产效率和产品质量等造成负面影响。而在各种降解纤维素的方法中，利用纤维素酶的生物降解法凭借反应条件温和、环境友好等优点，成为与有关纤维素的工业生产中的关注焦点。

2、内切葡聚糖酶是一种重要的纤维素酶，能够随机剪切纤维素多糖链内部的无定形区域，水解糖苷键、打破纤维素链，产生不同长度的寡糖和新链的末端，在降解纤维素分子中发挥重要作用。根据最适ph的不同，可将内切葡聚糖酶分为酸性内切葡聚糖酶、中性内切葡聚糖酶和碱性内切葡聚糖酶，分别适用于不同的应用本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种内切葡聚糖酶突变体，其特征在于，所述内切葡聚糖酶突变体的氨基酸序列由如SEQ ID NO.1所示序列经突变得到，所述突变为V217L或A123S/I165V或A123G/I165L/V185S/V217C。

2.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1所述的内切葡聚糖酶突变体。

3.根据权利要求2所述的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子的核苷酸序列由如SEQID NO.2所示序列经碱基突变得到。

4.一种载体，其特征在于，包含权利要求3所述的核苷酸序列。

5.根据权利要求4所述的载体，其特征在于，所述载体为克隆载体或表达...

【技术特征摘要】

1.一种内切葡聚糖酶突变体，其特征在于，所述内切葡聚糖酶突变体的氨基酸序列由如seq id no.1所示序列经突变得到，所述突变为v217l或a123s/i165v或a123g/i165l/v185s/v217c。

2.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1所述的内切葡聚糖酶突变体。

3.根据权利要求2所述的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子的核苷酸序列由如seqid no.2所示序列经碱基突变得到。

4.一种载体，其特征在于，包含权利要求3所述的核苷酸序列。

5.根据权利要求4所述的载体，其特征在于，所述载体为克隆载体或表达载体。

6.一种重组细胞，其特征在于，所述重组细胞包含权利要求4所述的载体。<...

【专利技术属性】
技术研发人员：任鑫坤，余克洋，王瑾丰，曲展，程冰洁，吴怡菲，
申请(专利权)人：南京大学，
类型：发明
国别省市：