分离、测定左亚叶酸钙中间体Z2及其有关杂质的方法技术

本发明专利技术属于分析化学技术领域，具体涉及一种分离、测定左亚叶酸钙中间体Z<subgt;2</subgt;及其有关杂质的方法。本发明专利技术采用高效液相色谱法进行分离、定性和定量检测，包括色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相A为磷酸盐缓冲液，流动相B为甲醇；通过梯度洗脱将左亚叶酸钙中间体Z<subgt;2</subgt;及其有关杂质进行分离，并进入检测器进行检测，得到色谱图；采用面积归一化法计算各杂质含量。该方法操作简单，专属性强，灵敏度高，耐用性好，对左亚叶酸钙的质量控制具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分析化学，具体涉及一种分离、测定左亚叶酸钙中间体z2及其有关杂质的方法。

技术介绍

1、左亚叶酸钙中间体z2是左亚叶酸钙合成过程中的关键中间体，其中文化学名为(6ar)-3-氨基-8-[4-[[(2s)-1,3-二羧基丙基]氨甲酰基]苯基]-1-氧代-2,5,6,6a,7,8-八氢-1h-咪唑并[1,5-f]蝶啶-10-氯化物，分子式为c20h22cln7o6；分子量为528.35；结构式如式ⅰ所示。

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3、研究证实，左亚叶酸钙中间体z2中可能存在杂质z1、杂质a、杂质z2b、左亚叶酸钙等杂质，左亚叶酸钙的结构式如式ⅱ所示，杂质z1的结构式如式ⅲ所示，杂质a的结构式如式ⅳ所示，杂质z2b的结构式如式ⅴ所示。

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5、杂质a为药典杂质，在各个反应步骤中均进行控制，考察其在各步反应中的消除情况。杂质z2b具警示结构芳胺，为基毒杂质。在中间体z1合成z2反应过程中，z1中的杂质z1b(具警示结构芳胺，其结构式如式vi所示)与甲酸生成的副产物为杂质z2b，属于工艺杂质；并且z2水解也产生杂质z2b本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.HPLC法分离左亚叶酸钙中间体Z2及其杂质的方法，其特征在于，所述杂质包括杂质A、杂质Z1、杂质Z2b、左亚叶酸钙中的任一种或多种；所述HPLC法的色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相包括流动相A和流动性B，所述流动相A为磷酸盐缓冲液，所述流动相B为甲醇；通过梯度洗脱依次将杂质A、杂质Z1、杂质Z2b、左亚叶酸钙中间体Z2和/或左亚叶酸钙进行分离；

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述梯度洗脱的程序如下：

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流动相A的浓度为0.01-0.03mol/L，pH为3.0-3.5。</p>

4.根据...

【技术特征摘要】

1.hplc法分离左亚叶酸钙中间体z2及其杂质的方法，其特征在于，所述杂质包括杂质a、杂质z1、杂质z2b、左亚叶酸钙中的任一种或多种；所述hplc法的色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相包括流动相a和流动性b，所述流动相a为磷酸盐缓冲液，所述流动相b为甲醇；通过梯度洗脱依次将杂质a、杂质z1、杂质z2b、左亚叶酸钙中间体z2和/或左亚叶酸钙进行分离；

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述梯度洗脱的程序如下：

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流动相a的浓度为0.01-0.03mol/l，ph为3.0-3.5。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流动性的流速为1.4-1.6ml/min，色谱柱的柱温为43-47℃。

5.鉴定左亚叶酸钙中间体z2中杂质的方法，其特征在于，所述杂质包括所述杂质a、所述杂质z1、所述杂质z2b中的任一种或多种；所述方法包括：采用权利要求1-4任一项所述的方法对左亚叶酸钙中间体z2及其杂质进行分离；进入检测器进行检测，得到色谱图；将检测品的色谱图和已知对照品的色谱图进行对比，判断检测品中是否含有所述杂质a、杂质z1、杂质z2b中的任一种或多种。

6.根据权利要求5...

【专利技术属性】
技术研发人员：余智奎，陈雯，周书荣，刘阔，
申请(专利权)人：重庆华邦制药有限公司，
类型：发明
国别省市：