白头翁素及其组合物在抗病毒方面的应用制造技术

本发明专利技术公开了白头翁素及含白头翁素的组合物在抗病毒方面的应用，本发明专利技术研究人员通过体外药理实验发现白头翁素在１．０６３μｇ／ｍＬ浓度对ＨｅｐＧ２．２．１５细胞的抗原抑制率为９８．０４％，证明了白头翁素具有抗乙肝病毒病毒的作用。含白头翁素的组合物，经过体外药理试验表明在０．３９７μｇ／ｍＬ浓度对ＨｅｐＧ２．２．１５细胞的抗原抑制率不低于９８．４９％，证明了含白头翁素的组合物具有抗乙肝病毒的作用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于医药
，具体涉及白头翁素及其组合物在抗病毒方面的应用,
技术介绍
根据卫生部统计资料显示，我国肝炎发病率为世界之最，有2亿肝炎病毒携带者， 住院病人约1. 2亿，而且还有继续扩大的趋势。虽然治疗肝炎的药物很多，但真正疗效好的 药物很少。拉米夫定虽然效果很好，但复发率高，因而寻找新的抗乙肝病毒药物意义重大。 白头翁素(Anemonin)，异名白头翁脑(Anemone camphor ;Pulsatilla camphor), 也少有文献称银莲花素(Anemonin ;Anemone camphor)。分子式是C1QH804，化学名 禾尔是the dilactone of cyclobutene-l， 2-diol-l， 2-diacrylic acid， 结构式是<formula>formula see original document page 3</formula>白头翁素有显著的抗菌作用，对葡萄球菌、链球菌、白喉杆菌的抑菌浓度为i : 12500，对结核杆菌为i : 50000。到目前为止尚未见到白头翁素及其组 合物在抗病毒方面应用的文献报道，本专利技术研究人员经过体外药理实验验证了白头翁素具 有显著的抗病毒作用。
技术实现思路
以含有白头翁素或原白头翁素的植物或中草药为原料(经水蒸气蒸馏或溶剂提 取)或经过人工合成，制得白头翁素纯品，经过体外药理试验发现白头翁素在1.063yg/mL 浓度对H印G2. 2. 15细胞的抗原抑制率不低于98. 04% ，证明了白头翁素具有抗乙肝病毒的 作用。 以含有白头翁素或原白头翁素的植物或中草药为原料(经水蒸气蒸馏或溶 剂提取)制得的含白头翁素的组合物，经过体外药理试验表明在0. 397ii g/mL浓度对 H印G2. 2. 15细胞的抗原抑制率不低于98. 49 % ，证明了含白头翁素的组合物具有抗乙肝病 毒的作用。 本专利技术的目的在于提供以白头翁素和含白头翁素的组合物为基本活性成分在抗 病毒方面的用途。 本专利技术的白头翁素及其组合物可以与药剂学上能接受的相应辅料结合制成中药 注射剂，冻干粉针，水针，口服制剂，片剂，胶囊，颗粒剂，糊剂，涂膜剂，贴膏剂，膜剂。 白头翁素的药理试验 药物白头翁素，自制(面积归一化法纯度大于98%);含白头翁素的组合物， 从威灵仙水蒸气蒸馏提取物制得(面积归一化法白头翁素含量0.01% 98%)细胞株 H印G2. 2. 15 (乙肝病毒(HBV)DNA克隆转染人肝癌细胞H印G2的2. 2. 15细胞系)购自北京大学医学部病毒研究所，置于371\饱和湿度、5% C02培养箱中用DMEM培养。拉米夫定(Lamivudine 3TC，贺普丁片):葛兰素-史克制药(苏州)有限公司产品，批号200400604。 (1)白头翁素抗乙肝病毒的体外药理实验 培养细胞然后用胰蛋白酶消化成单个细胞接种于96孔培养板，于5% C02培养箱 中37t:培养24h后吸去上清液，换入不同浓度含药培养液105ia，同时设不含药物对照组； 每3天换新鲜含药培养液，共3次，最后吸出的细胞上清液-2(TC保存待检，采用ELISA法检 测各孔OD值。要求阳性对照(不含药物细胞培养液)OD值应> 0. 5，阴性对照(无细胞 的培养液)OD值应《O.l(空白校零后)；临界值(C.O.)计算临界值(CO.) =2.1X阴 性对照平均OD值(备注阴性对照平均OD值小于0. 05按0. 05计算，大于0. 05按实际值 计算。);结果判定样品OD值^临界值(C.O.)为HBsAg阳性，样品OD值〈临界值(C. 0.) 为HBsAg阴性。抗原抑制率(％ )=(对照组平均P/N值-实验组平均P/N值)/对照组平 均P/N值X100X，结果见表1。 表1白头翁素抗乙肝病毒体外实验结果浓度(ug/mL)OD值抑制率(％)白头翁素1.0630.038398.04白头翁素0.270.315983.85白头翁素0.1060.358681.67拉米夫定2000.264186.4%阴性对照0.05阳性对照1.9563 结论白头翁素抗乙肝病毒活性比临床现用药拉米夫定强。 将制备得到的白头翁素以一定的浓度做体外实验，用ELISA法检测，试验结果表 明样品具有抗病毒活性，最高抗原抑制率为98. 04%。体外抗病毒实验结果表明白头翁素比 临床现用药拉米夫定具有更高的抑制率。 (2).含白头翁素的组合物抗乙肝病毒的体外药理实验 培养细胞然后用胰蛋白酶消化成单个细胞接种于96孔培养板，于5% C02培养箱 中37t:培养24h后吸去上清液，换入不同浓度含药培养液105ul，同时设不含药物对照组； 每3天换新鲜含药培养液，共3次，最后吸出的细胞上清液-2(TC保存待检，采用ELISA法检 测各孔OD值。要求阳性对照0D值应^0.5，阴性对照0D值应《0. l(空白校零后)；临界 值(C.O.)计算临界值(C.O.) =2. IX阴性对照平均OD值(备注阴性对照平均OD值小 于0.05按0.05计算，大于0.05按实际值计算。)；结果判定样品OD值^临界值(C. 0.) 为HBsAg阳性，样品OD值〈临界值(CO.)为HBsAg阴性。抗原抑制率(％ )=(对照组平 均P/N值-实验组平均P/N值)/对照组平均P/N值X 100% ，结果见表2。 表2白头翁素组合物抗乙肝病毒体外实验结果4<table>table see original document page 5</column></row><table> 将白头翁素组合物以一定的浓度做体外实验，用ELISA法检测，试验结果表明样 品具有抗病毒活性，最高抗原抑制率为98. 49%，比临床现用药拉米夫定具有更高的抑制本文档来自技高网...

【技术保护点】
白头翁素及含白头翁素的组合物在抗病毒方面的应用。

【技术特征摘要】
白头翁素及含白头翁素的组合物在抗病毒方面的应用。2. 如权利要求1所述的含白头翁素的组合物，其特征在于白头翁素与非白头翁素物质 的组合。3. 如权利要求1所述的白头翁素或含白头翁素的组合物来自天然界或人工化学合成 或生物技术制得。4. 如权利要求3所述的白头翁素及含白头翁素的组合物来自天然界，其特征在于主要 来自含有白头翁素或含原白头翁素的植物或中药...

【专利技术属性】
技术研发人员：张宏桂，王春梅，张海丰，郗瑞云，陈斌，
申请(专利权)人：张宏桂，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]