一种适应于SrCas12a-18蛋白的缓冲体系及其应用制造技术

技术编号:43294872 阅读:23 留言:0更新日期:2024-11-12 16:13
本发明专利技术提供一种适应于SrCas12a‑18蛋白的缓冲体系,所述缓冲体系由以下组分组成:Tris缓冲液1~20mM、MgCl<subgt;2</subgt; 6~10mM、牛磺酸40~60mM、NaAc 0~7.5mM、BSA 70~200μg/mL、余量为水;所述缓冲体系pH为7.5~9.0;其中,NaAc可用NaCl替代,BSA可用ac‑BSA替代。所述缓冲液,可应用于相关标靶核酸的检测或相关的检测试剂盒中;与现有的基础Buffer和商购缓冲体系相比较而言效果更好,荧光信号值更高,使其能在15min内检测到靶标DNA,降低了信号较差导致的误判,提高了检测灵敏度和准确性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分子检测,具体涉及一种适应于srcas12a-18蛋白的缓冲体系及其应用。


技术介绍

1、传染病的爆发极大地推动了基于crispr的诊断平台的进一步发展,寨卡病毒的爆发为首次批准的crispr诊断奠定了基础。随着crispr-cas工具的利用,许多基于crispr的检测分析已经被引入并应用于检测广泛的传染病,并进行了适当的优化。例如,通过将nasbacc介导的rna扩增连接到冻干纸质平台上的脚踏板开关rna传感器,nasbacc已经从病毒血症猕猴的血浆中检测到寨卡病毒。通过有条件优化holmes,将crispr-cas12a与pcr扩增相结合,使基于crispr的工具箱从定性检测进化到定量检测,并推动下一代基于crispr的分子诊断的进一步发展。

2、cas12a附加的反式切割功能,可以切割特定单链核酸探针,通过将核酸探针标有荧光标记和淬灭标记来实现核酸检测。crispr-cas12a体外应用检测体系主要由cas12a蛋白酶、sgrna、同时含有荧光标记和淬灭标记的报告dna探针和靶标dna、体外检测缓存体系构成。理论上,只要体系本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种适应于SrCas12a-18蛋白的缓冲体系,其特征在于,所述缓冲体系由以下组分组成:Tris缓冲液1~20mM、MgCl2 6~10mM、牛磺酸40~60mM、NaAc 0~7.5mM、BSA 70~200μg/mL、余量为水;所述缓冲体系pH为7.5~9.0;

2.根据权利要求1所述的缓冲体系,其特征在于,所述缓冲体系由以下组分组成:Tris缓冲液1~8mM、MgCl2 6~8mM、牛磺酸45~55mM、NaAc 0~5mM、BSA 170~200μg/mL、余量为水;所述缓冲体系pH为7.5~8.0;

3.根据权利要求1所述的缓冲体系,其特征在于,所述...

【技术特征摘要】

1.一种适应于srcas12a-18蛋白的缓冲体系,其特征在于,所述缓冲体系由以下组分组成:tris缓冲液1~20mm、mgcl2 6~10mm、牛磺酸40~60mm、naac 0~7.5mm、bsa 70~200μg/ml、余量为水;所述缓冲体系ph为7.5~9.0;

2.根据权利要求1所述的缓冲体系,其特征在于,所述缓冲体系由以下组分组成:tris缓冲液1~8mm、mgcl2 6~8mm、牛磺酸45~55mm、naac 0~5mm、bsa 170~200μg/ml、余量为水;所述缓冲体系ph为7.5~8.0;

3.根据权利要求1所述的缓冲体系,其特征在于,所...

【专利技术属性】
技术研发人员:王恒王洪饶
申请(专利权)人:武汉尚睿生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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