一种弓形虫GRA6和ROP2A抗原mRNA-LNP疫苗及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种弓形虫GRA6和ROP2A抗原mRNA‑LNP疫苗及其应用，选择在弓形虫三个感染阶段均有表达的致密颗粒蛋白6(GRA6)和棒状体蛋白2的α亚基(ROP2A)作为目的抗原，随后体外转录获得GRA6mRNA和ROP2A mRNA，制备了LNP和mRNA‑LNP疫苗，测评了三种弓形虫mRNA‑LNP疫苗对小鼠体液免疫和细胞免疫的影响以及免疫保护力。结果显示mRNA‑LNP疫苗能激活小鼠的体液免疫与细胞免疫，保护小鼠免受弓形虫侵害。本研究为mRNA疫苗预防弓形虫病提供了理论基础，推动了mRNA疫苗在动物传染病中的应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及免疫学和生物学领域，具体的说，本专利技术涉及一种弓形虫gra6和rop2a抗原mrna-lnp疫苗及其应用。

技术介绍

1、弓形虫是一种胞内寄生性顶复门原虫，能感染所有的温血动物。弓形虫病是一种由弓形虫引起的寄生虫病，已在世界范围内流行。免疫正常的人群患弓形虫病后多数没有明显症状；但免疫功能低下的人群感染后较为严重，如发展为心肌炎、肺炎或脑炎；孕妇在孕期的原发性感染可能导致胎儿先天性畸形或脑病，甚至死亡。

2、在弓形虫病的治疗方面，目前常用的是乙胺嘧啶和磺胺嘧啶的组合，这两种药物通过叶酸代谢的两个步骤协同作用；还有其他疗法如将前者与克林霉素、阿奇霉素或阿托伐醌联合使用。尽管在过去十年中，利用高通量筛选策略发现新的化学物质，包括具有抗虫活性的天然产物；或重新利用或改进现有的批准药物用于治疗弓形虫病。虽然药物是治疗的主要策略，但它们耐受性差，具有严重的副作用和耐药性，并且不能对抗弓形虫病的慢性感染阶段。因此，开发有效和安全的对弓形虫急慢性感染均有效的疫苗是重要且紧迫的。

3、理想的弓形虫疫苗应当具有高的免疫保护力和低的毒力本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种对弓形虫多个感染阶段均有保护性的抗原，其特征在于，所述抗原为改造后的弓形虫GRA6和ROP2A，其中所述改造后的GRA6的核苷酸序列为SEQ ID NO.4所示；所述改造后的ROP2A的核苷酸序列为SEQ ID NO.5所示。

2.一种脂质纳米颗粒，所述脂质纳米颗粒由四种脂质组成，分别是4-(N,N-二甲基氨基)丁酸(二甲油基)甲酯(DLin-MC3-DMA)，二硬脂酰磷脂酰胆碱(DSPC)，胆固醇(CHO-HP)和培化二肉豆蔻酸甘油酯2000(DMG-PEG2000)。

3.如权利要求2所述的一种脂质纳米颗粒，其中四种材料的摩尔比分别为：50:10:38...

【技术特征摘要】

1.一种对弓形虫多个感染阶段均有保护性的抗原，其特征在于，所述抗原为改造后的弓形虫gra6和rop2a，其中所述改造后的gra6的核苷酸序列为seq id no.4所示；所述改造后的rop2a的核苷酸序列为seq id no.5所示。

2.一种脂质纳米颗粒，所述脂质纳米颗粒由四种脂质组成，分别是4-(n,n-二甲基氨基)丁酸(二甲油基)甲酯(dlin-mc3-dma)，二硬脂酰磷脂酰胆碱(dspc)，胆固醇(cho-hp)和培化二肉豆蔻酸甘油酯2000(dmg-peg2000)。

3.如权利要求2所述的一种脂质纳米颗粒，其中四种材料的摩尔比分别为：50:10:38.5:1.5或者为50:10:37.5:2.5。

4.一种权利要求2或3所述的脂质纳米...

【专利技术属性】
技术研发人员：张厚双，李冰洁，周金林，曹杰，周勇志，王亚楠，张凯，
申请(专利权)人：中国农业科学院上海兽医研究所中国动物卫生与流行病学中心上海分中心，
类型：发明
国别省市：