System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种一体化血小板膜包线粒体、制备方法及应用技术_技高网

一种一体化血小板膜包线粒体、制备方法及应用技术

技术编号:43287768 阅读:24 留言:0更新日期:2024-11-12 16:08
本发明专利技术提供了一种一体化血小板膜包线粒体、制备方法及应用,涉及生物学技术领域。一体化血小板膜包线粒体由血小板和血小板本身含有的线粒体进行自组装而得。其制备方法包括:S1、从富含血小板血浆中分离提取血小板;S2、将血小板进行自组装得到一体化血小板膜包线粒体。制备的一体化血小板膜包线粒体具有较高活性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物学,具体而言,涉及一种一体化血小板膜包线粒体、制备方法及应用


技术介绍

1、血小板除了常见凝血作用之外,现在的研究表明血小板在免疫调节中扮演重要角色,可作为炎症调控靶向的标兵,而炎症的发生往往伴随着线粒体功能障碍的发生,然而单纯的血小板含有的线粒体数量极少,通常需要提取分离外源线粒体以制备用于治疗该类疾病的线粒体。

2、目前临床和实验中膜包线粒体主要方法为分别提取外源细胞膜以及细胞、机体组织中分离外源线粒体,通过超声按一定比例将细胞膜结合至线粒体,替换受损的线粒体,针对线粒体功能障碍疾病进行治疗,但是,由于细胞或组织提取的线粒体在体外极其不稳定,以上制备方法时间长,实验步骤复杂,不利于线粒体体外保留生物活性。


技术实现思路

1、本专利技术的目的在于提供一种一体化血小板膜包线粒体、制备方法和应用,其可以制备得到较高活性线粒体,对线粒体功能障碍类疾病有较好的治疗效果。

2、本专利技术通过以下技术方案实现:

3、第一方面,本专利技术提供一种一体化血小板膜包线粒体,由血小板和血小板本身含有的线粒体进行自组装而得。

4、第二方面,本专利技术提供一种一体化血小板膜包线粒体的制备方法,包括以下步骤:

5、s1、从富含血小板血浆中分离提取血小板;

6、s2、将血小板进行自组装得到一体化血小板膜包线粒体。

7、进一步的,步骤s1中,所述富含血小板血浆通过试剂盒分离提取血小板。其中,向富血小板血浆中富含血小板的上清中加入试剂盒a,400g,8min进行离心,取上清;向上清中加入试剂盒b,离心400g,8min,取上清2500g,常温离心10min,取沉淀;向沉淀中加入缓冲液或洗涤液,2500g离心8min,沉淀即血小板。其中,试剂盒a和试剂盒b均为肉质网蛋白提取试剂盒(北京百奥莱博科技有限公司,hr8080)。利用试剂盒a和试剂盒b依次分离血小板与其他血细胞,可以逐步分离提取血小板,同时还有助于保留血小板中的线粒体,利用缓冲液或洗涤液对血小板进行洗涤和纯化,可以得到更纯净的血小板,有助于血小板和线粒体实现自组装,得到经血小板修饰的线粒体,保护线粒体活性。

8、进一步的,富含血小板血浆取自于大鼠眼眶静脉丛。其中,取血的具体操作过程为:用5%水合氯醛对大鼠进行麻醉后,准备枸缘酸钠抗凝管,取血针适量,对大鼠进行眼眶静脉丛取血于抗凝管中之后迅速转移至15ml的离心管中,于常温400g离心10min,取富血小板血浆中富含血小板的上清分离提取血小板。

9、进一步的,步骤s2中,将血小板超声破碎,离心,沉淀即为一体化血小板膜包线粒体。让血小板纳米化,得到血小板膜修饰的线粒体,完成血小板和线粒体的自组装。

10、进一步的,超声破碎10-20min,4000g离心5-15min。

11、第三方面,本专利技术提供一体化血小板膜包线粒体在制备线粒体功能障碍类疾病的药物中的应用,药物的剂型包括注射剂、片剂、胶囊剂、悬浮液、颗粒剂和粉剂中的一种或多种。

12、本专利技术的技术方案至少具有如下优点和有益效果:

13、本专利技术针对目前细胞膜包线粒体制备方法步骤复杂,通过直接提取血小板,血小板含有一定量的线粒体,直接超声破碎释放线粒体,再通过离心制备一体化血小板膜包线粒体,一步制备膜包线粒体,简化制备来保护线粒体活性,以解决上述问题。得到的一体化血小板膜包线粒体具有较高活,对线粒体功能障碍类疾病有较好的治疗效果。

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【技术保护点】

1.一种一体化血小板膜包线粒体,其特征在于:由血小板和血小板本身含有的线粒体进行自组装而得。

2.如权利要求1所述的一体化血小板膜包线粒体的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:

3.根据权利要求2所述的一体化血小板膜包线粒体的制备方法,其特征在于:步骤S1中,所述富含血小板血浆通过试剂盒分离提取血小板。

4.根据权利要求2或3所述的一体化血小板膜包线粒体的制备方法,其特征在于:所述富含血小板血浆取自于大鼠眼眶静脉丛。

5.根据权利要求2所述的一体化血小板膜包线粒体的制备方法,其特征在于:步骤S2中,将血小板超声破碎,离心,沉淀即为一体化血小板膜包线粒体。

6.根据权利要求5所述的一体化血小板膜包线粒体的制备方法,其特征在于:超声破碎10-20min,4000g离心5-15min。

7.如权利要求1-6任一项所述的一体化血小板膜包线粒体在制备线粒体功能障碍类疾病的药物中的应用,其特征在于,所述药物的剂型包括注射剂、片剂、胶囊剂、悬浮液、颗粒剂和粉剂中的一种或多种。

【技术特征摘要】

1.一种一体化血小板膜包线粒体,其特征在于:由血小板和血小板本身含有的线粒体进行自组装而得。

2.如权利要求1所述的一体化血小板膜包线粒体的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:

3.根据权利要求2所述的一体化血小板膜包线粒体的制备方法,其特征在于:步骤s1中,所述富含血小板血浆通过试剂盒分离提取血小板。

4.根据权利要求2或3所述的一体化血小板膜包线粒体的制备方法,其特征在于:所述富含血小板血浆取自于大鼠眼眶静脉丛。

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【专利技术属性】
技术研发人员:娄杰谢丽涓周小芳周兴
申请(专利权)人:重庆权生医药科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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