一种用于外泌体来源PD-L1蛋白高灵敏检测的酶放大SERS检测方法技术

本发明专利技术提供一种用于外泌体来源PD‑L1蛋白高灵敏检测的酶放大SERS检测方法。包括以下步骤；步骤一、外泌体来源PD‑L1蛋白与抗体的特异性结合；外泌体溶液稀释到适当浓度后，将偶联HRP的抗PD‑L1抗体滴加到外泌体溶液中，孵育30mi n；步骤二、TSA/PSA反应。本发明专利技术提供的用于外泌体来源PD‑L1蛋白高灵敏检测的酶放大SERS检测方法，通过将已有探针标记的AuNP偶联到Tyrami ne/Styrami de缀合物上，在H<subgt;2</subgt;O<subgt;2</subgt;存在的情况下，Tyrami ne/Styrami de缀合物可以被HRP转化为高活性的氧化中间体，与外泌体蛋白质快速共价结合，实现检测信号的放大，除了不增加非特异性吸附外，该过程还减少了生物分子的消耗，TSA/PSA与SERS技术相结合，显著提高了检测的灵敏度。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及拉曼光谱，尤其涉及一种用于外泌体来源pd-l1蛋白高灵敏检测的酶放大sers检测方法。

技术介绍

1、肺癌是发病率和致死率最高的一种恶性肿瘤，其早期诊断的5年生存率可达60％以上，在肺癌治疗过程中，患者往往因化疗导致恶心、呕叶及骨髓抑制而停止治疗，所以，近年来，免疫治疗在临床上广泛应用，不仅对肿瘤细胞起杀伤作用，而且能够维持正常细胞增强患者免疫功能，减少不良反应的发生。同时治疗追踪也能达到及时发现不良反应，第一时间准确判断的作用。

2、外泌体是一类纳米级别的胞外囊泡，直径大约在30-150nm，广泛分布于血液、尿液、唾液、脑脊液和乳汁等体液中，恶性肿瘤微环境来源的外泌体带有来自母体肿瘤细胞的蛋白和核酸等物质，正在逐渐成为一种能用于肺癌早期诊断和治疗追踪的生物标志物。

3、外泌体携带的pd-l1蛋白参与诱导免疫逃逸以促进肿瘤进展，还可以通过直接与抗pd-l1抗体结合介导免疫治疗，并且研究表明，快速、简单、准确的外泌体pd-l1检测能提供肺癌病人精准的治疗追踪和治疗指导。

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【技术保护点】

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【技术特征摘要】

1.一种用于外泌体来源pd-l1蛋白高灵敏检测的酶放大sers检测方法，其特征在于，包括以下步骤；

2.根据权利要求1所述的一种用于外泌体来源pd-l1蛋白高灵敏检测的酶放大sers检测方法，其特征在于，步骤一中与hrp偶联的抗体通过以下步骤制备:

3.根据权利要求1所述的一种用于外泌体来源pd-l1蛋白高灵敏检测的酶放大sers检测方法，其特征在于，步骤二中纳米金球溶液的制备具体步骤为；

4.根据权利要求1所述的一种用于外泌...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄静，鄞缨欢，刘峻坤，潘春玲，刘晓丽，杜阳阳，
申请(专利权)人：华南师范大学，
类型：发明
国别省市：