基于基质硬度建立结肠癌肿瘤静止细胞三维模型的方法技术

本发明专利技术适用于生物工程技术领域，提供了基于基质硬度建立结肠癌肿瘤静止细胞（CQCs）三维模型的方法。通过高压蒸汽灭菌处理Alginate并配置溶液，与Matrigel和细胞悬液混合后，加入CaCO<subgt;3</subgt;悬浊液调节硬度，最终在特定条件下培养形成肿瘤球体。本发明专利技术构建出均一透明、凝胶时间可控且环境温和、适合细胞生长的三维细胞培养体系，为体外三维CQCs模型的建立提供了新的可能；本发明专利技术实现了对从健康结肠组织到结肠癌组织硬度的广泛覆盖，能够更真实地模拟体内环境，且提升了模型的稳定性；本发明专利技术首次发现并证明了硬基质能够促进结肠癌细胞球体中CQCs样特性的产生，为肿瘤转移和复发机制提供了新的视角和依据。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程，尤其涉及建立体外肿瘤三维模型的方法。

技术介绍

1、肿瘤静止细胞（cancer quiescent cells，cqcs）是指在肿瘤中处于休眠或非增殖状态的细胞群体，它们的存在不仅导致肿瘤的潜伏期延长，还增加肿瘤的耐药性，对治疗的效果产生影响。因此，对cqcs的研究对于理解肿瘤生物学、开发更有效的治疗策略以及预防肿瘤复发和转移具有重要意义。

2、目前研究者们探索cqcs的模型主要包括对培养皿中的细胞进行营养剥夺或化疗药物处理，而这种二维模型与体内真实情况有极大的差异，导致科研成果难以在体内验证。为了解决这一问题，亟需开发一种能够模拟真实肿瘤形态的体外三维cqcs模型。

3、实体瘤的发展过程常伴随着细胞外基质硬化，健康结肠的硬度通常低于0.5 kpa，而结肠癌组织硬度在1 kpa以上。目前尚无证据表明基质硬度的增加可诱导cqcs的产生。cqcs在肿瘤复发和化疗耐药性中的作用机制复杂多样，涉及细胞生物学、分子生物学和免疫学等多个层面。为了深入理解cqcs的生物学特性和作用机制，本专利技术提出基于基质硬度建立结肠癌本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.基于基质硬度建立结肠癌CQCs三维模型的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的基于基质硬度建立结肠癌CQCs三维模型的方法，其特征在于，所述步骤2中，细胞悬液、Matrigel及Alginate的体积比为1:1:2。

3.根据权利要求1所述的基于基质硬度建立结肠癌CQCs三维模型的方法，其特征在于，所述步骤3中，CaCO3悬浊液的制备过程为：制备浓度均为1M的CaCl2溶液和Na2CO3溶液，均过滤除菌，即时混合CaCl2溶液和Na2CO3溶液，生成浓度为0.5 M的CaCO3悬浊液。

4.根据权利要求1~3任一所述的基于基质硬...

【技术特征摘要】

1.基于基质硬度建立结肠癌cqcs三维模型的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的基于基质硬度建立结肠癌cqcs三维模型的方法，其特征在于，所述步骤2中，细胞悬液、matrigel及alginate的体积比为1:1:2。

3.根据权利要求1所述的基于基质硬度建立结肠癌cqcs三维模型的...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾一扬，郭彦彤，
申请(专利权)人：吉林大学，
类型：发明
国别省市：