一种细胞培养产品和制备方法及其应用技术

技术编号:43244429 阅读:27 留言:0更新日期:2024-11-05 17:27
本申请属于细胞生物学领域,具体涉及提高真核细胞贴壁性的产品及其应用。本申请提供一种细胞培养产品,其包括基底和在所述基底上面的自包被溶液中沉积的胶原蛋白、纤维粘连蛋白层或纤维粘连蛋白层。溶液中的纤维粘连蛋白浓度为50‑200微克/毫升或胶原蛋白浓度为1‑200微克/毫升。本申请还提供细胞培养产品的制备方法、使用该细胞培养产品培养贴壁细胞的方法、提高细胞贴壁能力的方法和评价细胞贴壁能力的方法。利用本申请提供的细胞培养产品,可使贴壁细胞重复使用而不丧失生物学功能,以使环境更友好和节约成本。本申请还开拓了研发细胞3D培养材料和技术的思路,更好的模拟细胞在体内的微环境使细胞能充分地在三维空间中生长。

【技术实现步骤摘要】

本申请属于细胞生物学领域,具体涉及一种提高真核细胞贴壁性的方法及其应用。


技术介绍

1、真核表达系统包括酵母、昆虫、哺乳动物等表达系统。其中哺乳动物细胞表达系统能够为重组人源蛋白提供最接近于天然状态的糖基化、乙酰化等多种翻译后修饰,会形成接近天然蛋白的蛋白质折叠和聚合,具备活性蛋白所必须的空间结构和修饰。因此,由哺乳动物细胞翻译后再加工修饰产生的外源蛋白质,在活性方面远胜于原核表达系统及酵母、昆虫细胞等真核表达系统,更接近于天然蛋白质。这一特性使得哺乳动物细胞表达系统在重组蛋白药物,特别是治疗性重组单抗药物的研发和生产中有最为广泛的应用。其中人胚肾293(hek 293)细胞是最常用的哺乳动物细胞系之一,其具有生长密度高和生长速度快的优势,细胞培养要求低,细胞生长迅速,倍增时间大概在34-36小时,hek 293 细胞既可以贴壁培养也可以悬浮培养,以脂质体、磷酸钙或pei作为转染试剂进行瞬时转染简单容易,可用于稳定和瞬时基因表达,因此被广泛用于生产蛋白、疫苗、抗癌试剂及重组腺病毒包被等。

2、当在机体内时,细胞与其他细胞或者细胞外基质结合,一种本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种细胞培养产品,其包括:

2.根据权利要求1所述的细胞培养产品,其特征在于,在所述包被溶液中,所述纤维粘连蛋白浓度为50-100微克/毫升或所述胶原蛋白浓度为1-20微克/毫升。

3.根据权利要求1所述的细胞培养产品,其特征在于,所述基底的材料是聚苯乙烯。

4.根据权利要求1所述的细胞培养产品,其特征在于,所述胶原蛋白和所述纤维粘连蛋白选自天然的、重组的或合成的蛋白。

5.根据权利要求4所述的细胞培养产品,其特征在于,所述胶原蛋白和所述纤维粘连蛋白的来源为人源。

6.一种制备细胞培养产品的方法,包括:</p>

7.根据...

【技术特征摘要】

1.一种细胞培养产品,其包括:

2.根据权利要求1所述的细胞培养产品,其特征在于,在所述包被溶液中,所述纤维粘连蛋白浓度为50-100微克/毫升或所述胶原蛋白浓度为1-20微克/毫升。

3.根据权利要求1所述的细胞培养产品,其特征在于,所述基底的材料是聚苯乙烯。

4.根据权利要求1所述的细胞培养产品,其特征在于,所述胶原蛋白和所述纤维粘连蛋白选自天然的、重组的或合成的蛋白。

5.根据权利要求4所述的细胞培养产品,其特征在于,所述胶原蛋白和所述纤维粘连蛋白的来源为人源。

6.一种制备细胞培养产品的方法,包括:

7.根据权利要求6所述的制备细胞培养产品的方法,其特征在于,所述溶液是0.01mm的磷酸盐缓冲溶液。

8.根据权利要求6或7所述的制备细胞培养产品的方法,其特征在于,所述溶液中的所述纤维粘连蛋白浓度为50-200微克/毫升或所述胶原蛋白浓度为1-200微克/毫升。

9.根据权利要求8所述的制备细胞培养产品的方法,其特征在于,所述溶液中的所述纤维粘连蛋白浓度为50-100微克/毫升或所述胶原蛋白浓度为1-20微克/毫升。

10.根据权利要求6或7所述的制备细胞培养产品的方法,还包括:将已经加入所述溶液的所述细胞培养基底置于4℃的条件中保持24小时后,移除所述溶液。

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【专利技术属性】
技术研发人员:张琛刘卫红刘迎建石培培
申请(专利权)人:汉王科技股份有限公司
类型:发明
国别省市:

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