Cpf1突变体及其用途制造技术

技术编号:43201998 阅读:94 留言:0更新日期:2024-11-01 20:20
本发明专利技术涉及一种Cpf1突变体及其用途。本发明专利技术提供的Cpf1突变体与野生型Cpf1相比具有增强的耐高温活性和/或更广的PAM特异性,不仅可以提升产品开发和检测技术的实用性以及准确性,还可以解决野生型Cpf1给模板选择带来的局限性问题,具有良好的应用前景和实用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物,具体涉及一种cpf1突变体及其用途、包含该cpf1突变体的生物材料、包含cpf1突变体的crispr/cas系统,以及一种体外检测样品中的靶核酸的方法。


技术介绍

1、crispr/cas技术是近年来研发出用于病原体检测的新一代分子诊断技术。crispr/cas技术中,其中一种核酸内切酶是具有侧支切割活性的cas12核酸内切酶。cas12酶有三个分支,分别包括cas12a、cas12c、cas12d、cas12e、cas12b、cas12h、cas12i和cas12g。在这些亚型中,cas12a和cas12b最常用于crispr/cas技术的检测中,其中优选cas12a(又称,cpf1),因为cas12b需要111个核苷酸的长grna,而cas12a酶仅需要41个核苷酸的短crrna。

2、crispr/cas反应的cas酶在37度左右,当crispr/cas与其他检测手段联用时,由于其他检测手段中所用的酶的反应温度与cas酶不同,可能会存在需要两个不同的温度的问题,这给产品开发和实用性带来很大的不便。</p>

3、此外本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种Cpf1突变体,其相对于SEQ ID NO:10所示的Cpf1,包含在第38位、第39位、第163位、第171位、第312位、第542位、第549位、第786位中的至少一个位置进行氨基酸替换。

2.根据权利要求1所述的Cpf1突变体,其中,所述Cpf1突变体的氨基酸序列与SEQ IDNO:10所示的氨基酸序列具有至少80%且小于100%、至少90%且小于100%、或者至少95%且小于100%的序列同一性。

3.根据权利要求2所述的Cpf1突变体,其中,所述氨基酸替换包括:

4.根据权利要求1-3任一项所述的Cpf1突变体,其中,相对于SEQ I...

【技术特征摘要】

1.一种cpf1突变体,其相对于seq id no:10所示的cpf1,包含在第38位、第39位、第163位、第171位、第312位、第542位、第549位、第786位中的至少一个位置进行氨基酸替换。

2.根据权利要求1所述的cpf1突变体,其中,所述cpf1突变体的氨基酸序列与seq idno:10所示的氨基酸序列具有至少80%且小于100%、至少90%且小于100%、或者至少95%且小于100%的序列同一性。

3.根据权利要求2所述的cpf1突变体,其中,所述氨基酸替换包括:

4.根据权利要求1-3任一项所述的cpf1突变体,其中,相对于seq id no:10所示的cpf1,所述cpf1突变体在第163位的天冬氨酸替换为精氨酸,并且任选地包含以下氨基酸替换中的任意一种、两种、三种、四种、五种、六种或七种:第38...

【专利技术属性】
技术研发人员:曹利勤
申请(专利权)人:上海先赛生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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