一种聚合酶突变体及其应用制造技术

本发明专利技术属于分子生物学领域，具体涉及一种ZO5 DNA聚合酶突变体及其应用。具体技术方案为：一种ZO5 DNA聚合酶突变体，在ZO5野生型聚合酶基础上突变获得，所述ZO5野生型聚合酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；突变位点包括：E628K、I709L、E744R、A745R。本发明专利技术提供的聚合酶突变体可以扩大其包括逆转录酶在内的多种活性的能力，可以使用RNA模板催化逆转录环介导的等温扩增。融合结合肽后的聚合酶突变体，具有很强的抗干扰能力，例如巧克力、花生酱、牛奶、海鲜、肉或蛋，巧克力、胡椒、血液、尿液、腐植酸、胆汁、单宁、黑色素、靛蓝染料、植物材料等的干扰；并可有效缩短LAMP所需时间。并可有效缩短LAMP所需时间。并可有效缩短LAMP所需时间。

【技术实现步骤摘要】
一种聚合酶突变体及其应用


[0001]本专利技术属于分子生物学领域，具体涉及一种聚合酶突变体及其应用。

技术介绍

[0002]Taq聚合酶和Bst聚合酶是两种众所周知的耐热DNA聚合酶，两者的晶体结构有50%的序列同源性。Taq聚合酶可以催化PCR（该反应要求酶必须耐受94℃），但Bst聚合酶的活性为65～70℃，因此不能催化PCR。同时，Taq聚合酶不能通过置换其前面的DNA链来复制双链DNA，且Taq聚合酶的5'
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核酸内切酶会降解置换的DNA；但Bst聚合酶可以有效地进行链置换而不降解，因此通常用于催化环介导的等温扩增（LAMP）。但Taq聚合酶和Bst聚合酶都没有逆转录酶（RT）活性,因此通常需要将单独的RT酶与之结合以完成RT
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PCR（逆转录酶聚合酶链反应）或类似的RT
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LAMP。
[0003]与之相对的，ZO5 DNA聚合酶具有很强的逆转录酶聚合酶链反应（RT
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PCR）活性,但不能通过链置换使DNA链复制双链DNA,因此不能用于催化环介导的等温扩增本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种ZO5 DNA聚合酶突变体，其特征在于：在ZO5野生型聚合酶基础上突变获得，所述ZO5野生型聚合酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；突变位点包括：E628K、I709L、E744R、A745R。2.根据权利要求1所述聚合酶突变体，其特征在于：突变位点还包括：E710K、E710L、E710N、E710Q、E710I、E710W、E710R、E710V、E710S中任意一项的突变。3.根据权利要求1或2所述聚合酶突变体，其特征在于：所述聚合酶突变体对所述野生型聚合酶进行截短后获得。4.根据权利要求3所述聚合酶突变体，其特征在于：在所述野生型聚合酶的第282位进行截短。5.根据权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡学军，曹利勤，
申请(专利权)人：上海先赛生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：