一种检测EGFR基因突变的电化学传感器及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种检测EGFR基因突变的电化学传感器及其制备方法，属于生物传感器技术领域。本发明专利技术解决了现有技术中EGFR突变基因的检测方法存在的数据处理复杂、费用昂贵、检测周期长以及侵入性大等问题。本发明专利技术设计一对茎环序列引物取代常规LAMP引物，避免了多引物间的交叉杂交产生的非特异性扩增；以GDY‑Au TNPs作为传感平台提高检测灵敏度，并修饰亚甲基蓝‑单链DNA作为报告基因。当LAMP产物中存在靶标DNA时，形成DNA/crRNA/Cas12a三联体复合物，激活Cas12a的反式切割能力，切割报告基因，使电极上的氧化还原介质发生变化，并通过电化学方法检测整个信号变化。本发明专利技术达到了即时、快速、低成本的检测EGFR基因突变的目的，为临床医生诊断疾病、评估治疗效果提供强有力的技术支撑。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物传感器，具体涉及一种检测egfr基因突变的电化学传感器及其制备方法。

技术介绍

1、egfr属于受体酪氨酸激酶家族，与细胞信号通路的激活密切相关，包括细胞增殖和凋亡保护。相关研究表明，egfr在多种肿瘤中均有过度表达，尤其是非小细胞肺癌(nsclc)。通过egfr而设计的酪氨酸激酶抑制剂可显著改善nsclc的临床病程，但仅对携带egfr基因激活突变的肿瘤有效，这种突变主要存在于酪氨酸激酶区域18-21外显子，其中egfr 19缺失(del e746-a750)和egfrl858r点突变占90％。egfr 19缺失发生最频繁，约占48％。

2、目前，用于egfr突变基因检测的首选方案仍然是基因测序法，包括sanger测序、高通量测序(next generation sequencing,ngs)、单分子测序等。其作为基因检测的金标准，不但能检测突变存在的情况，还能确定突变的位置，且能同时检测多位点突变。但是该检测方法存在以下缺陷：

3、1、数据处理复杂：由于基因测序产生的数据量巨大，数据处理和分析需要复杂的算法和计算本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种检测EGFR基因突变的电化学传感器，其特征在于：包括传感器平台、连接启动的LAMP靶标核酸扩增体系以及Cas12a-crRNA双链体；

2.根据权利要求1所述的检测EGFR基因突变的电化学传感器，其特征在于：所述复合纳米层为经聚赖氨酸改性的片层石墨炔-形貌为三角纳米片状的金纳米粒子复合纳米层。

3.根据权利要求1或2所述的检测EGFR基因突变的电化学传感器，其特征在于：

4.根据权利要求1或2所述的检测EGFR基因突变的电化学传感器，其特征在于：扩增前内引物FIP的基因序列为：

5.根据权利要求1或2所述的检测EGFR基因突变的电化...

【技术特征摘要】

1.一种检测egfr基因突变的电化学传感器，其特征在于：包括传感器平台、连接启动的lamp靶标核酸扩增体系以及cas12a-crrna双链体；

2.根据权利要求1所述的检测egfr基因突变的电化学传感器，其特征在于：所述复合纳米层为经聚赖氨酸改性的片层石墨炔-形貌为三角纳米片状的金纳米粒子复合纳米层。

3.根据权利要求1或2所述的检测egfr基因突变的电化学传感器，其特征在于：

4.根据权利要求1或2所述的检测egfr基因突变的电化学传感器，其特征在于：扩增前内引物fip的基因序列为：

5.根据权利要求1或2所述的检测egfr基因突变的电化学传感器，其特征在于：cas12a-cr...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈梅，陈祠志，付杨，魏雨忻，何林欣，谢林芝，
申请(专利权)人：成都医学院，
类型：发明
国别省市：