本发明专利技术提供了一种利用环形RNA进行蛋白翻译及其应用，具体地，本发明专利技术提供一种环形RNA构建物，所述环形RNA构建物从5’‑3’方向具有式I所示的结构：TI‑Z1‑Z2(I)，式中，TI为翻译起始元件；Z1为表达外源蛋白的表达盒；Z2为无或其他元件。本发明专利技术的环形RNA构建物在体内体外均可显著增强翻译效率。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物，具体地，涉及利用环形rna进行蛋白翻译及其应用。
技术介绍
1、蛋白质是生物体内最重要的生物大分子，其突变或者表达异常都会导致疾病发生。因而，通过蛋白质替代或者表达可以治疗相应的疾病。常见的蛋白质替代或者表达疗法包括基于核糖核酸(dna)载体的递送系统、基于脱氧核糖核酸(rna)载体的递送系统以及蛋白质递送系统。这些方法都需要通过信使rna翻译产生蛋白质。在真核生物体内常见的翻译起始方式是帽依赖性翻译，其主要通过翻译起始因子识别信使rna 5′端的特殊帽结构来起始翻译，该类翻译方式只存在于线性信使rna中存在。此外，还存在着一类非帽依赖性的翻译起始，其主要通过特定蛋白因子与rna元件间的互作启动翻译。这类翻译可以在线性或者环形rna中起始翻译。常见的非帽依赖性翻译起始元件是病毒rna中一些具有特定二级结构的元件，它们可以借用宿主细胞的翻译系统表达自己所需的蛋白质。例如，脑心肌炎病毒或者丙型肝炎病毒等rna中含有的内部核糖体进入位点(internal ribosome entry site：ires)元件。
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【技术保护点】
1.一种环形RNA构建物，其特征在于，所述环形RNA构建物从5’-3’方向具有式I所示的结构：
2.一种载体，其特征在于，所述载体含有权利要求1所述的构建物的表达盒。
3.一种基因工程细胞，其特征在于，所述基因工程细胞的基因组的一个或多个位点整合有权利要求1所述的构建物，或者所述基因工程细胞中含有权利要求2所述的载体。
4.一种反应体系，其特征在于，包括：
5.如权利要求4所述的反应体系，其特征在于，所述反应体系还包括YTHDF3、PABPC1、和/或hnRNPA1蛋白。
6.一种体外合成蛋白质的方法，其特征在于，包括步骤：...
【技术特征摘要】
1.一种环形rna构建物，其特征在于，所述环形rna构建物从5’-3’方向具有式i所示的结构：
2.一种载体，其特征在于，所述载体含有权利要求1所述的构建物的表达盒。
3.一种基因工程细胞，其特征在于，所述基因工程细胞的基因组的一个或多个位点整合有权利要求1所述的构建物，或者所述基因工程细胞中含有权利要求2所述的载体。
4.一种反应体系，其特征在于，包括：
5.如权利要求4所述的反应体系，其特征在于，所述反应体系还包括ythdf3、pab...
【专利技术属性】
技术研发人员：王泽峰，杨赟，樊晓娟，
申请(专利权)人：上海环码生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：
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