一种光衰老细胞HES1敲降模型的构建方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种光衰老细胞HES1敲降模型的构建方法及其应用，所述构建方法包括：A、将原代细胞接种于完全培养基中，培养七天，得P1代细胞；期间，在培养的第二天和第四天分别进行UVA照射并换液；B、将P1代细胞重复步骤A的相同处理，得P3～P5代细胞；C、将HES1siRNA转染步骤B获得的P3～P5代细胞，培养45～50h后，进行第二次转染，继续培养45～50h，即得。本发明专利技术光衰老细胞的HES1敲降模型通过将早期光衰老细胞进行HES1敲降处理后，快速得到了衰老表型与普通连续传代获得的晚期衰老细胞基本一致的光衰老细胞，可用于检测评估皮肤光衰老。且其相比普通连续传代获得的晚期衰老细胞时间上更为高效，节省了时间成本以及解决了后期衰老细胞获取困难的问题。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及细胞生物学，具体涉及一种光衰老细胞hes1敲降模型的构建方法及其应用。

技术介绍

1、皮肤衰老是人体最直观最直接的表征。皮肤最容易受到外界环境的影响而衰老，特别是紫外辐射是环境中最易影响皮肤衰老的外源性因素，而这种外源性因素也是通过皮肤内源性起作用，从而导致皮肤的衰老。所以我们在研究皮肤光衰老的过程中，通常需要建立一个光衰老模型去研究光导致的内源性衰老的原因。紫外辐射主要包括太阳光中的uva和uvb，相比uvb，uva的能量低，但照射剂量是uvb的20倍以上，占比高达95％。研究进一步表明，uvb主要损伤是表皮层，而uva主要损伤的真皮层，我们一般建立uva评估光衰老的评价方法。

2、目前关于皮肤衰老评价的方法有多种，主要包括临床评价、重组三维真皮表皮皮肤模型评价、常规体外细胞评价。这三种方法均有其优缺点，像临床评价的优势在于其指标更接近于人体真实的生理衰老表型，但会耗费大量的人力和物力，需要专业的皮肤医生以及非常昂贵的设备，投入的成本也会很高。而对于重组三维真皮表皮皮肤模型评价来说，是比较接近临床评价的方法，但其缺点也很明显，制本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种光衰老细胞HES1敲降模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的光衰老细胞HES1敲降模型的构建方法，其特征在于，步骤A中，所述原代细胞选自人原代成纤维细胞、人原代角质形成细胞、人原代黑色素细胞中的任一种；

3.根据权利要求1所述的光衰老细胞HES1敲降模型的构建方法，其特征在于，步骤A中，所述进行UVA照射的辐照剂量为14.4J、照射时间为10min。

4.根据权利要求1所述的光衰老细胞HES1敲降模型的构建方法，其特征在于，步骤C中，所述HES1 siRNA转染采用lipo3000脂质体转染法进行。

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【技术特征摘要】

1.一种光衰老细胞hes1敲降模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的光衰老细胞hes1敲降模型的构建方法，其特征在于，步骤a中，所述原代细胞选自人原代成纤维细胞、人原代角质形成细胞、人原代黑色素细胞中的任一种；

3.根据权利要求1所述的光衰老细胞hes1敲降模型的构建方法，其特征在于，步骤a中，所述进行uva照射的辐照剂量为14.4j、照射时间为10min。

4.根据权利要求1所述的光衰老细胞hes1敲降模型的构建方法，其特征在于，步骤c中，所述hes1 sirna转染采用lipo3000脂质体转染法进行。

5.根据权利要求1所述的光衰老细胞hes1敲降模型的...

【专利技术属性】
技术研发人员：李新强，冯超彦，刘宗艳，伍承龙，卢伊娜，刘青，
申请(专利权)人：上海珈凯生物股份有限公司，
类型：发明
国别省市：