一种尿苷二磷酸的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种尿苷二磷酸的制备方法，涉及尿苷二磷酸生产技术领域，通过在选择培养基中加入1％的尿苷和0.5％的尿苷一磷酸，筛选出能够提高尿苷二磷酸转化率的高质量菌体，菌体发酵培养后进行破碎并与尿苷一磷酸、ATP、Mg<supgt;2+</supgt;、poly‑p转化，得到含UDP的转化液，最后依次通过陶瓷膜、超滤膜过滤，再过阳离子树脂柱和氯型阴离子交换树脂进行脱盐和纯化，最后用纳滤膜浓缩和醇沉法得到高纯度的UDP。提高了UDP的转化率，简化了纯化流程，降低了生产成本，为UDP的大规模生产和应用提供了有力支持。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及尿苷二磷酸生产，具体涉及一种尿苷二磷酸的制备方法。

技术介绍

1、尿苷二磷酸(uridine diphosphate，udp)是一种核苷酸，是由焦磷酸(pyrophosphate)官能基加上五碳核糖及碱基尿嘧啶组成。

2、尿苷二磷酸(udp)是合成阿普林津(ampligen)的原料之一。阿普林津是一种错配双链rna药物(polyl:c12u)，具有抗病毒和免疫调节的双重作用，高效低毒。目前，在国外该药正在进行一些疾病的临床实验，包括慢性疲劳综合症、艾滋病、乙肝等。

3、目前对于尿苷二磷酸(udp)的制备方法很少有人进行深入的研究，只是其衍生物，尤其是udp糖类由于药用广泛而引起国内外的重视。尿苷二磷酸葡萄糖(uridinediphosphate glucose，udpg)，是广泛分布于微生物、动植物细胞内的一种核苷酸糖，在生物体内，当合成各种苷、寡糖、多糖时用作葡萄糖的供体。尿苷二磷酸(udp)也是酶催化合成尿苷二磷酸葡萄糖(udpg)的重要底物之一。

4、中国专利cn1962875b公开了一种尿苷二磷酸(本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种尿苷二磷酸的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的一种尿苷二磷酸的制备方法，其特征在于，步骤A中具体的筛选条件为：将含有聚磷酸激酶和尿苷一磷酸激酶的重组大肠杆菌在固体培养基上涂布后，放于37℃环境内培养16h，挑取1～2cm2的菌苔接种于250ml LB液体培养基，37℃、220rpm转速下恒温培养至菌液为OD600值为1.6～1.8，得培养菌液；

3.如权利要求1所述的一种尿苷二磷酸的制备方法，其特征在于，步骤B中发酵培养基的组成：葡萄糖30g/L、硫酸铵42g/L、磷酸二氢钾0.8g/L、七水硫酸镁0.1g/L、甘油10g/L、豆油...

【技术特征摘要】

1.一种尿苷二磷酸的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的一种尿苷二磷酸的制备方法，其特征在于，步骤a中具体的筛选条件为：将含有聚磷酸激酶和尿苷一磷酸激酶的重组大肠杆菌在固体培养基上涂布后，放于37℃环境内培养16h，挑取1～2cm2的菌苔接种于250ml lb液体培养基，37℃、220rpm转速下恒温培养至菌液为od600值为1.6～1.8，得培养菌液；

3.如权利要求1所述的一种尿苷二磷酸的制备方法，其特征在于，步骤b中发酵培养基的组成：葡萄糖30g/l、硫酸铵42g/l、磷酸二氢钾0.8g/l、七水硫酸镁0.1g/l、甘油10g/l、豆油1g/l、硫酸亚铁0.01g/l、氯化锰0.01g/l。

4.如权利要求1所述的一种尿苷二磷酸的制备方法，其特征在于：步骤c发酵液中的菌体的加入量占转化液体积的10-20od/ml；

5.如权利要求1所述的一种尿苷二磷酸的制备方法，其特征在于：步骤d中陶瓷膜的孔径为5...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱理平，徐良平，淮建路，邱崇顺，马旭，魏萍萍，
申请(专利权)人：诸城市浩天药业有限公司，
类型：发明
国别省市：