一种核酸适配体及其修饰温启动逆转录酶的应用和产品制造技术

本发明专利技术提供了一种核酸适配体及其修饰温启动逆转录酶的应用和产品，属于分子诊断技术领域。本发明专利技术提供了特异性结合逆转录酶的核酸适配体，具有如SEQ ID NO.38‑45所示的任意一种或多种核苷酸序列，其生产周期短技术成熟，适用于大规模商业生产。核酸适配体结合逆转录酶后，逆转录酶的低温活性被封闭，使37℃外切活性封闭率98%以上，启动温度达37℃以上。通过抑制低温储存时产生二级结构，使反应液能长期持续稳定高效地获得逆转录产物，解决了全预混液储存稳定性的难题。制备得到的试剂盒特异性好，亲和力强，灵敏度高，反应速度快，经济成本低，结果重复性好，数据精准客观可靠。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分子诊断，具体涉及一种核酸适配体及其修饰温启动逆转录酶的应用和产品。

技术介绍

1、在分子诊断领域，目前用于核酸扩增的主要手段仍然是pcr技术。在pcr过程中，用于识别核酸扩增信号的方法主要有两类，一类是利用与靶向核酸序列特异性结合的荧光探针（例如taqman探针），在解离过程中释放出荧光信号来表示核酸扩增结果，另一类是通过与双链扩增产物非特异结合的荧光染料（例如sybr）释放的荧光信号来表示，前者更适用于特定疾病的核酸检测。

2、在核酸检测中，针对dna样本，为了提高体系的特异性和灵敏度，大家普遍选择针对taq dna聚合酶的聚合酶活性进行活性封闭，即热启动（taq dna聚合酶热激活之前不表现聚合酶活性），使其在热激活之前不工作也就不会产生引物二聚体等非特异扩增。而rna样本扩增时，多了一步逆转录的过程，rna扩增也额外多需求一个逆转录酶，而逆转录酶由于其耐热性没有taq dna聚合酶那样高，无法采用同样的活性封闭方式。这样在低温存储试剂时体系中引物在逆转录酶作用下会缓慢发生非特异扩增，即引物二聚体，引物二聚体也会进行pcr扩本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种特异性结合逆转录酶的核酸适配体，其特征在于，所述的核酸适配体具有如SEQID NO.38-45所示的任意一种或多种核苷酸序列。

2.根据权利要求1所述的核酸适配体，其特征在于，所述的核酸适配体的核苷酸序列上的3'端碱基被磷酸化、氧甲基化、甲基化、氨基化、双脱氧或巯基化。

3.根据权利要求2所述的核酸适配体，其特征在于，所述的逆转录酶具有如SEQ IDNO.59所示的氨基酸序列。

4.权利要求1-3任一项所述的核酸适配体在修饰逆转录酶中的应用。

5.一种温启动逆转录酶，其特征在于，所述的温启动逆转录酶包括：将逆转录酶与权利要求1-3任...

【技术特征摘要】

1.一种特异性结合逆转录酶的核酸适配体，其特征在于，所述的核酸适配体具有如seqid no.38-45所示的任意一种或多种核苷酸序列。

2.根据权利要求1所述的核酸适配体，其特征在于，所述的核酸适配体的核苷酸序列上的3'端碱基被磷酸化、氧甲基化、甲基化、氨基化、双脱氧或巯基化。

3.根据权利要求2所述的核酸适配体，其特征在于，所述的逆转录酶具有如seq idno.59所示的氨基酸序列。

4.权利要求1-3任一项所述的核酸适配体在修饰逆转录酶中的应用。

5.一种温启动逆转录酶，其特征在于，所述的温启动逆转录酶包括：将逆转录酶与权利要求1-3任一项所述的核酸适配体混合，孵育后得到温启动逆转录酶。

6.根据权利要求5所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：邢亚东，黄欢，何胜祥，
申请(专利权)人：苏州源启生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：