用于构建病毒包装的质粒、病毒载体及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种用于构建病毒包装的质粒、病毒载体及其应用，用于构建病毒包装的质粒依次包括U6启动子序列、靶向免疫检查点的shRNA序列或者靶向过度释放促炎因子的shRNA序列、CD45启动子序列、靶向嵌合抗原受体的序列，其中U6启动子序列用于驱动所述shRNA序列，和所述CD45启动子序列用于驱动所述靶向嵌合抗原受体的序列。CD45启动子的效果很好，而且体积很小，然使用CD45启动子来驱动CAR表达，在CAR的上下游各表达一个shRNA序列的策略很简单。可以使用两种针对不同靶点的shRNA来实现抗肿瘤活性的多方面增强或降低CAR‑T细胞的毒性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及肿瘤治疗，特别涉及一种用于构建病毒包装的质粒、病毒载体及其应用。

技术介绍

1、嵌合抗原受体基因修饰t(car-t)细胞疗法是将t细胞进行改造，使其表达一个包括抗原识别域、共刺激域和t细胞激活域的融合蛋白，经过改造的car-t细胞可以特异性识别并消除表达靶抗原的肿瘤细胞，这项免疫疗法被誉为未来肿瘤治疗的希望。经美国食品药品监督管理局(fda)批准上市的car-t细胞产品有六种，其中四款的靶点为cd19，cd19靶点研发的巨大成功刺激了其他靶点的研究。

2、短发夹rna(short hairpin rna，shrna)属于rna干扰(rna interference，rnai)范畴，转导或转染细胞后，在细胞核中合成前体shrna，其正义链和反义链通过碱基配对形成茎区，中间未配对的核苷酸形成环状，整个结构成发夹结构。经过核糖核酸酶iiidrosha及dgcr8加工后，被exportin-5蛋白转运到细胞质中，然后经核糖核酸酶iiidicer及trbp/pact酶切，去除环状结构的序列，形成sirna。sirna与risc识别并整合后，本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于构建病毒包装的质粒，其特征在于，所述质粒依次包括U6启动子序列、靶向免疫检查点的shRNA序列或者靶向过度释放促炎因子的shRNA序列、CD45启动子序列、靶向嵌合抗原受体的序列，其中U6启动子序列用于驱动所述shRNA序列，和所述CD45启动子序列用于驱动所述靶向嵌合抗原受体的序列。

2.一种用于构建病毒包装的质粒，其特征在于，所述质粒依次包括U6启动子序列、靶向免疫检查点1的shRNA序列或者靶向过度释放促炎因子1的shRNA序列、CD45启动子序列、靶向嵌合抗原受体的序列、U6启动子序列、靶向免疫检查点2的shRNA序列或者靶向过度释放促炎因子2的shRNA...

【技术特征摘要】

1.一种用于构建病毒包装的质粒，其特征在于，所述质粒依次包括u6启动子序列、靶向免疫检查点的shrna序列或者靶向过度释放促炎因子的shrna序列、cd45启动子序列、靶向嵌合抗原受体的序列，其中u6启动子序列用于驱动所述shrna序列，和所述cd45启动子序列用于驱动所述靶向嵌合抗原受体的序列。

2.一种用于构建病毒包装的质粒，其特征在于，所述质粒依次包括u6启动子序列、靶向免疫检查点1的shrna序列或者靶向过度释放促炎因子1的shrna序列、cd45启动子序列、靶向嵌合抗原受体的序列、u6启动子序列、靶向免疫检查点2的shrna序列或者靶向过度释放促炎因子2的shrna序列，其中u6启动子序列用于驱动所述shrna序列，和所述cd45启动子序列用于驱动所述靶向嵌合抗原受体的序列，所述免疫检查点1和免疫检查点2可以是相同的免疫检查点，也可以是不同的免疫检查点，过度释放促炎因子1和过度释放促炎因子2可以是相同的过度释放促炎因子，也可以是不同的过度释放促炎因子。

3.根据权利要求1或2所述的质粒，其特征在于，所述免疫检查点1或免疫检查点2是pd1、tox、nr4a1和lsd1中的任一个，和/或，所述过度释放促炎因子1或过度释放促炎因子2是扰素γ、肿瘤坏死因子...

【专利技术属性】
技术研发人员：王建勋，刘秀盈，刘静静，冯义超，朱晶晶，
申请(专利权)人：深圳细胞谷生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：