一种小型CRISPR-Cas系统及其应用技术方案

本发明专利技术公开了一种小型CRISPR‑Cas系统及其应用。本发明专利技术提供了一种小型CRISPR‑Cas系统(i)VbCasX蛋白和(ii)VbCasX指导RNA，所述VbCasX指导RNA与所述VbCasX蛋白形成复合物，且所述VbCasX指导RNA包含与靶核酸中的靶序列杂交的指导序列；其中，所述VbCasX蛋白识别的原间隔序列相邻基序包含5’‑TTR‑3’，其中R为G或者A。本发明专利技术提供的系统中的Cas蛋白小于目前已知常用的Cas家族蛋白，并且该系统识别的PAM序列与目前已知常用的CRISPR‑Cas系统不同，拓展了CRISPR‑Cas系统在基因组中使用的编辑活性窗口。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因编辑，涉及一种小型crispr-cas系统及其应用。

技术介绍

1、成簇、规律间隔的短回文重复序列及其相关蛋白(clustered regularlyinterspaced short palindromic repeats-crispr associated proteins，crispr-cas)系统是一种存在于细菌和古细菌中的适应性免疫系统，通过适应、表达和干扰三个阶段防御外源核酸的入侵。人们利用这一特性，将crispr-cas系统开发为强大的基因编辑工具，成功运用于基因表达调控、基因功能探究、核酸检测等相关科学研究。然而，crispr-cas系统在被运用于基因组编辑时存在一些限制，例如原间隔序列邻近基序(protospaceradjacent motif,pam)对靶基因的约束性、脱靶效应、系统大小对细胞递送的限制和系统的免疫反应性等，阻碍了其应用范围的进一步拓展，具体描述如下：

2、1.1crispr-cas系统的pam约束

3、近年来，crispr-cas系统被广泛应用于人类细胞、动物、植物等多种生物的本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种小型CRISPR-Cas系统，其包括：

2.根据权利要求1所述的小型CRISPR-Cas系统，其中，所述VbCasX蛋白源自Verrucomicrobia bacterium。

3.根据权利要求1或2所述的小型CRISPR-Cas系统，其中，所述VbCasX蛋白包含以下序列中的一种或多种：

4.根据权利要求1～3任一项所述的小型CRISPR-Cas系统，其中，所述VbCasX指导RNA为双指导RNA；

5.根据权利要求1～4任一项所述的小型CRISPR-Cas系统，其中，所述VbCasX指导RNA为单指导RNA；

6.根...

【技术特征摘要】

1.一种小型crispr-cas系统，其包括：

2.根据权利要求1所述的小型crispr-cas系统，其中，所述vbcasx蛋白源自verrucomicrobia bacterium。

3.根据权利要求1或2所述的小型crispr-cas系统，其中，所述vbcasx蛋白包含以下序列中的一种或多种：

4.根据权利要求1～3任一项所述的小型crispr-cas系统，其中，所述vbcasx指导rna为双指导rna；

5.根据权利要求1～4任一项所述的小型crispr-cas系统，其中，所述vbcasx指导rna为单指导rna；

6.根据权利要求1～5任一项所述的小型crispr-cas系统，其中，所述小型c...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘俊杰，李承平，杨韵，李丹苑，汪岷，董波，梁彦韬，
申请(专利权)人：清华大学，
类型：发明
国别省市：