高背景组织样本中肠毒素脆弱拟杆菌检测用探针引物及试剂盒制造技术

本发明专利技术提供了高背景组织样本中肠毒素脆弱拟杆菌检测用探针引物及试剂盒。检测中所用的上游引物和下游引物的序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示；探针序列如SEQ ID NO.3所示。本发明专利技术进一步提供了一种肠毒素脆弱拟杆菌检测试剂盒，还提供了相应的检测方法。本发明专利技术可快速、灵敏的检测和定量样本中的ETBF，并对石蜡包埋组织样本中的低丰度ETBF的检测具有良好的效果。为在人群中开展ETBF感染流行病学调查奠定基础，为探索结肠炎、炎症性肠病和结直肠肿瘤等疾病的发生发展机制及后续科学防控相关疾病奠定基础，具有十分重要的研究意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物检测，涉及肠道微生物检测，具体涉及肠毒素脆弱拟杆菌(enterotoxigenic bacteroides fragilis,etbf)的检测，尤其涉及石蜡包埋组织样本等高背景样本中肠毒素脆弱拟杆菌的检测。

技术介绍

1、肠毒素脆弱拟杆菌(enterotoxigenic bacteroides fragilis,etbf)是一种有害肠道细菌，具有特异性基因bftp(genbank:u67735.1)，可编码产生一种含锌金属蛋白酶毒素，称为bft(bf-derived toxin,bft)，在部分人群中可引起急性炎症性腹泻。与此同时，越来越多的研究证实，肠道菌群中etbf丰度的增加可导致炎症性肠病和结直肠癌的发生。通过技术手段快速、准确的检测和鉴定样本中的etbf，可为上述疾病的预防、诊断和治疗提供依据。

2、etbf的鉴定主要依赖于实时荧光定量pcr技术(quantitative real-time pcr，qpcr)，该技术是在pcr体系中加入荧光基团，在扩增过程中基于荧光信号的积累过程，对pcr进程进行实时检测。qpcr主本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种高背景组织样本中肠毒素脆弱拟杆菌检测用探针引物组合物，其特征在于，上游引物和下游引物的序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示；探针序列如SEQ IDNO.3所示。

2.根据权利要求1所述的探针引物组合物，其特征在于，所述探针的5'端设置生物素标签。

3.一种肠毒素脆弱拟杆菌qPCR检测试剂盒，其特征在于，包含权利要求1～2任一项所述的探针引物组合物。

4.根据权利要求3所述的肠毒素脆弱拟杆菌qPCR检测试剂盒，其特征在于，还包括扩增试剂，该扩增试剂选自10×反应预混液以及ddH2O。

5.根据权利要求4所述的肠...

【技术特征摘要】

1.一种高背景组织样本中肠毒素脆弱拟杆菌检测用探针引物组合物，其特征在于，上游引物和下游引物的序列分别如seq id no.1和seq id no.2所示；探针序列如seq idno.3所示。

2.根据权利要求1所述的探针引物组合物，其特征在于，所述探针的5'端设置生物素标签。

3.一种肠毒素脆弱拟杆菌qpcr检测试剂盒，其特征在于，包含权利要求1～2任一项所述的探针引物组合物。

4.根据权利要求3所述的肠毒素脆弱拟杆菌qpcr检测试剂盒，其特征在于，还包括扩增试剂，该扩增试剂选自10×反应预混液以及ddh2o。

5.根据权利要求4所述的肠毒素脆弱拟杆菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：常文军，胡雪菲，陈林娇，沈昊，傅亚婷，陈佳晖，王俊杰，潘亚敏，
申请(专利权)人：中国人民解放军海军军医大学，
类型：发明
国别省市：