一种用于区分野生型风疹病毒和疫苗型风疹病毒的荧光PCR引物探针组合物及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种用于区分野生型风疹病毒和疫苗型风疹病毒的荧光PCR引物探针组合物及其应用；本发明专利技术采用荧光PCR技术结合熔解曲线技术原理，以风疹病毒基因作为靶基因，根据风疹病毒野生型与疫苗型的差异区段、保守区段分别设计引物探针，再根据人源性GAPDH基因保守区段设计引物探针，最后将引物和探针分别按照上述的终浓度配置成引物探针混合液，进行实时荧光检测，对检测出的阳性风疹样品为野生型或疫苗型进行准确区分，具有检测灵敏度高、特异性高的特点；尤其地，本发明专利技术通过区分野生型和疫苗型RV，探讨BRDI疫苗株对近年风疹野病毒流行株的保护效果，降低风疹和先天性风疹综合征(CRS)的发病率具有重要的意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及体外诊断试剂，具体地，涉及一种用于区分野生型风疹病毒和疫苗型风疹病毒的荧光pcr引物探针组合物、试剂盒及检测方法。

技术介绍

1、风疹是由风疹病毒(rv)感染引起的一种急性呼吸道传染病，风疹是一种疫苗可预防疾病，接种风疹病毒疫苗是预防风疹最有效的措施。2008年，中国将风疹疫苗纳入国家扩大免疫规划，对适龄儿童进行常规接种。风疹疫苗虽然没有传染性，但孕妇接种后，可存在感染胎儿的风险。

2、依据ws297-2008风疹诊断标准的记载，对于风疹的诊断方法主要有血清学和pcr方法。血清学方法利用elisa检测人血清中抗风疹病毒的igm抗体，但该方法很难用于区分风疹病毒的野生型与疫苗型。现有技术通常采用pcr的方法进行风疹病毒的鉴定，结合测序的方式对毒株进行分型然后用于区分不同的型别，但是测序周期长，且对样本浓度要求较高。

3、目前，中国使用两种风疹减毒活疫苗分别为ra27/3株疫苗和brdii株疫苗，以brdii株疫苗为主。研究发现，ra27/3株疫苗属于1a基因型rv，而brdii减毒活疫苗株属于2a基因型rv，均与我国现流本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于区分野生型风疹病毒和疫苗型风疹病毒的荧光PCR扩增的引物探针组合物，其特征在于，所述引物探针组合物由四条引物和三条探针组成；

2.如权利要求1所述的用于区分野生型风疹病毒和疫苗型风疹病毒的荧光PCR引物探针组合物，其特征在于，所述扩增风疹病毒保守区段的引物，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.2所示；

3.如权利要求2所述的用于区分野生型风疹病毒和疫苗型风疹病毒的荧光PCR引物探针组合物，其特征在于，所述检测风疹病毒的探针的核苷酸序列的5’端和3’端分别标记FAM荧光素和BHQ1荧光淬灭基团；所述区分野生型风疹病毒和疫苗型风疹病毒...

【技术特征摘要】

1.一种用于区分野生型风疹病毒和疫苗型风疹病毒的荧光pcr扩增的引物探针组合物，其特征在于，所述引物探针组合物由四条引物和三条探针组成；

2.如权利要求1所述的用于区分野生型风疹病毒和疫苗型风疹病毒的荧光pcr引物探针组合物，其特征在于，所述扩增风疹病毒保守区段的引物，其核苷酸序列如seq id no.1～seq id no.2所示；

3.如权利要求2所述的用于区分野生型风疹病毒和疫苗型风疹病毒的荧光pcr引物探针组合物，其特征在于，所述检测风疹病毒的探针的核苷酸序列的5’端和3’端分别标记fam荧光素和bhq1荧光淬灭基团；所述区分野生型风疹病毒和疫苗型风疹病毒的探针的核苷酸序列的5’端和3’端分别标记vic荧光素和bhq1荧光淬灭基团；所述检测人源性gapdh基因保守区段的探针的核苷酸序列的5’和3’分别标记rox荧光素和bhq2荧光淬灭基团。

4.一种用于区分野生型风疹病毒和疫苗型风疹病毒的检测试剂，至少包括如权...

【专利技术属性】
技术研发人员：浮苗，黄心仪，唐静，王金华，马拥军，
申请(专利权)人：金华市中心医院，
类型：发明
国别省市：