【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医药，一种凝胶色谱法测定蛋白琥珀酸铁口服溶液中蛋白琥珀酸铁分子量及分子量分布的方法。
技术介绍
1、蛋白琥珀酸铁口服溶液为意大利泛马克大药厂开发的多肽类蛋白补铁剂，蛋白琥珀酸铁由酪蛋白经丁二酸酐酰化后和三氯化铁络合后制得。它在ph值小于4时呈沉淀状态，而在碱性条件下又重新变成可溶性物质。蛋白琥珀酸铁受蛋白膜的保护而不被胃酸破坏和胃蛋白酶水解，对胃黏膜不造成损伤。在进入肠道后，重新溶解，并被胰蛋白酶水解，铁在十二指肠内开始释放。
2、蛋白琥珀酸铁口服溶液为棕红色略粘稠液体，其黏度主要由分子量决定。蛋白琥珀酸铁口服溶液的分子量不仅可能会对生产工艺产生影响，也有可能会对体内释放造成影响。因而，亟需一种蛋白琥珀酸铁的分子量及其分布的检测方法。
技术实现思路
1、本专利技术旨在提供一种凝胶色谱法测定蛋白琥珀酸铁分子量及分子量分布的方法，本专利技术提供的方法测试结果的准确性、重现性和耐用性良好。
2、为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
3、本专利技术提供一种凝胶色谱法测定蛋白琥珀酸铁分子量及分子量分布的方法，包括以下步骤：
4、s1.配制对照品溶液：将分子量分别为3.05×103，1.26×104，6.33×104，1.02×105的葡聚糖对照品用稀释剂溶解，得1～5mg/ml的溶液；
5、s2.绘制标准曲线：将不同分子量的对照品溶液进样液相色谱仪，记录保留时间，绘制标准曲线；
6、s3.
7、s4.供试品溶液测定：将供试品溶液进行色谱分析，通过标准曲线法计算不同保留时间下的蛋白琥珀酸铁的分子量，得到蛋白琥珀酸铁的分子量及分子量分布。
8、进一步地，步骤s1中所述稀释剂为含有十二水合磷酸氢二钠8.94g，二水合磷酸二氢钠3.92g的0.2mol/l～1.0mol/l氯化钠溶液。
9、进一步地，步骤s2和步骤s4所用的色谱柱为tskgel g3000swxl和tskgelg4000swxl2支串联。
10、进一步地，步骤s2和步骤s4所述色谱分析条件为：检测器为示差折光检测器；流动相为含有十二水合磷酸氢二钠8.94g，二水合磷酸二氢钠3.92g的0.2mol/l～1.0mol/l氯化钠溶液；流速为0.6～1.0ml/min；柱温：25～40℃；进样量为：50～100μl。
11、进一步地，步骤s2中所述标准曲线是以对照品线性溶液中主峰的保留时间为横坐标，以对照品的分子量对数值为纵坐标，采用多项式拟合而得。
12、本专利技术的有效效果如下：
13、本专利技术通过适宜浓度的对照品(即不同分子量的对照品)、色谱柱、流动相的合理选择，实现了蛋白琥珀酸铁分子量及分子量分布的测定，通过选择合适的对照品，采用色谱柱和流动相进行配合，最终可对产品进行有效的评估分子量和分子量分布，更好的评估产品的质量属性，如采用其他区间的分子量对照品不易很好的计算和评价该产品的质量属性(即分子量和分子量分布)，在本专利技术色谱条件下能够便捷、快速的实现不同分子量蛋白琥珀酸铁的分离，经实验验证，本专利技术方法操作简单，快速，结果专属性强、重现性高、准确度高、精密度好、溶液稳定性高、多批次间一致性良好。
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1.一种凝胶色谱法测定蛋白琥珀酸铁口服溶液中蛋白琥珀酸铁分子量及分子量分布的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种凝胶色谱法测定蛋白琥珀酸铁的分子量及分子量分布的方法，其特征在于：步骤S1中所述稀释剂为含有十二水合磷酸氢二钠8.94g，二水合磷酸二氢钠3.92g的0.2mol/L～1.0mol/L氯化钠溶液。
3.根据权利要求1所述的一种凝胶色谱法测定蛋白琥珀酸铁的分子量及分子量分布的方法，其特征在于：步骤S2和步骤S4所用的色谱柱为TSKgel G3000SWXL和TSKgelG4000SWXL2支串联。
4.根据权利要求1所述的一种凝胶色谱法测定蛋白琥珀酸铁的分子量及分子量分布的方法，其特征在于：步骤S2和步骤S4所述色谱分析条件为：检测器为示差折光检测器；流动相为含有十二水合磷酸氢二钠8.94g，二水合磷酸二氢钠3.92g的0.2mol/L～1.0mol/L氯化钠溶液；流速为0.6～1.0mL/min；柱温：25～40℃；进样量为：50～100μL。
5.根据权利要求1所述的一种凝胶色谱法测定蛋白琥珀酸
...【技术特征摘要】
1.一种凝胶色谱法测定蛋白琥珀酸铁口服溶液中蛋白琥珀酸铁分子量及分子量分布的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种凝胶色谱法测定蛋白琥珀酸铁的分子量及分子量分布的方法，其特征在于：步骤s1中所述稀释剂为含有十二水合磷酸氢二钠8.94g，二水合磷酸二氢钠3.92g的0.2mol/l～1.0mol/l氯化钠溶液。
3.根据权利要求1所述的一种凝胶色谱法测定蛋白琥珀酸铁的分子量及分子量分布的方法，其特征在于：步骤s2和步骤s4所用的色谱柱为tskgel g3000swxl和tskgelg4000swxl2支串联。
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【专利技术属性】
技术研发人员：周秋红，许福春，喻喜华，邱晓峰，石贞香，陈喜生，杨林英，钟晓琴，蔡收入，郑佩娟，张娟，
申请(专利权)人：国药控股星鲨制药厦门有限公司，
类型：发明
国别省市：
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