PCV2 VLPs的纯化方法技术

本发明专利技术涉及病毒纯化技术领域，特别涉及PCV2 VLPs的纯化方法。本发明专利技术通过对杆状病毒表达的圆环PCV2 VLPs原液进行单一疏水层析、单一MMC复合填料层析、MMC复合填料层析+疏水相互作用层析两步层析的3种方式纯化，均得到了很好的效果。本发明专利技术所提供的对圆环PCV2 VLPs的纯化方法操作简单，在能够提升产品的纯度同时，收率较高。另外对操作人员的要求较低，大大缩短了因纯化方式和纯度不够而引起的繁琐的纯化步骤而不易大规模制备的缺点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及病毒纯化，特别涉及pcv2 vlps的纯化方法。

技术介绍

1、猪圆环病毒2型（porcine cirovirus 2，pcv2）是一种单股负链环状dna病毒，无囊膜，pcv2被认为是现如今对世界养猪业危害最大的病原之一，它可以引起一系列的相关疾病，包括断奶仔猪多系统衰竭综合症、猪皮炎肾病综合征、猪呼吸道疾病综合征等，对不同阶段的猪均可造成感染。

2、pcv2 cap蛋白是构成猪圆环病毒2型衣壳的唯一结构蛋白，存在病毒的主要抗原决定簇。病毒样颗粒（virus-like particles，vlps）是由病毒的一种或多种结构蛋白自我组装或人工组装而成，高度结构化且不含有病毒遗传物质的空心颗粒。pcv2病毒样颗粒（virus-like particles，vlps）是重组表达的pcv2 cap蛋白，先将5个cap蛋白组装成一个五聚体，12个五聚体组装成一个60聚体的vlps，与天然的病毒粒子结构相近，vlps的形成可以诱导中和抗体的产生，而单体cap或cap片段导致免疫显性诱饵表位非中和抗体的产生，从而保护力下降，导致免疫原性差，而自本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.PCV2 VLPs的纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.如权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，步骤1所述离心的条件包括10000rpm，4℃，15min。

3.如权利要求1或2所述的纯化方法，其特征在于，步骤2所述疏水相互作用层析之前还包括调节盐浓度的步骤；优选地，包括调节待测样本中的氯化钠浓度至2.4M。

4.如权利要求1至3任一项所述的纯化方法，其特征在于，步骤2所述MMC复合填料层析的具体步骤包括：取MMC Large Scale装柱，采用PB溶液平衡，上样所述澄清液，再次采用所述PB溶液平衡至UV电导率和UV值平稳，采用含有0.5~...

【技术特征摘要】

1.pcv2 vlps的纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.如权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，步骤1所述离心的条件包括10000rpm，4℃，15min。

3.如权利要求1或2所述的纯化方法，其特征在于，步骤2所述疏水相互作用层析之前还包括调节盐浓度的步骤；优选地，包括调节待测样本中的氯化钠浓度至2.4m。

4.如权利要求1至3任一项所述的纯化方法，其特征在于，步骤2所述mmc复合填料层析的具体步骤包括：取mmc large scale装柱，采用pb溶液平衡，上样所述澄清液，再次采用所述pb溶液平衡至uv电导率和uv值平稳，采用含有0.5~2.0m氯化钠的pb溶液洗脱，检测波长为280nm的uv值变化10mau时开始收集洗脱液，获得所述pcv2 vlps。

5.如权利要求4所述的纯化方法，其特征在于，所述氯化钠的浓度包括0.7~1.0m。

6.如权利要求4或5任一项所述的纯化方法，其特征在于，步骤2所述mmc复合填料层...

【专利技术属性】
技术研发人员：牛旻，杨瑞华，李国强，刘美，张婷，
申请(专利权)人：河南兴华生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：