一种酶法合成硒酸软骨素的生物合成方法及其应用技术

技术编号:42896171 阅读:17 留言:0更新日期:2024-09-30 15:13
本发明专利技术公开了一种酶法合成硒酸软骨素的生物合成方法及其应用,属于生物技术领域。本发明专利技术借鉴硫酸软骨素合成路径首次通过HsC4ST实现了非天然硒酸软骨素的生物合成。通过对HsC4ST底物结合相关位点的改造,成功获得了催化性能提高的突变体。相较于原始酶,突变体HsC4ST‑R138V的硒酸软骨素转化率较野生型HsC4ST(44%)提高至67%。本发明专利技术为硒代有机物的生物合成开辟新路径和奠定理论技术基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种酶法合成硒酸软骨素的生物合成方法及其应用,属于生物。


技术介绍

1、硒(se)是一种生命活动必需的微量营养元素,主要以硒代有机物的形式存在于生物机体中,并参与重要的生理过程。由于硒具有营养学和毒理学作用,在营养健康和生物医药领域受到了广泛关注。近年来一些有机硒化物如硒代蛋氨酸、硒代半胱氨酸、硒多糖等已成为se补充的重要来源。然而,天然有机硒化物来源受限、硒含量低,以及化学合成工艺复杂、选择性差等因素,均难以满足有机硒化物的规模化生产和持续快速增长的市场需求。由于硒代有机物生物合成工具的匮乏和研究仍处于起步阶段,发展绿色高效的生物合成依然是挑战。

2、自80年代阐明了硒引入蛋白和核酸的合成机制,30多年来硒引入有机物的生物合成领域一直未有进展。硒引入多糖及其它有机物的生物合成酶系缺乏和机制仍不清晰,严重制约了硒代有机物的广泛挖掘与应用研究。目前商品化硒多糖主要来自植物提取,受限于植物硒多糖含量较低、生产周期漫长、品质不稳定和生产成本高等因素,远远无法满足实际生产与巨大的健康市场需求。基于代谢工程技术已实现多种功能性多糖的微生物绿本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种磺基转移酶突变体,其特征在于,所述突变体是在氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的野生酶的基础上,进行第138位的突变。

2.如权利要求1所述的突变体,其特征在于,所述第138位的突变是将精氨酸突变为缬氨酸。

3.编码权利要求1或2所述突变体的基因。

4.携带权利要求3所述基因的表达载体。

5.表达权利要求1或2所述突变体或携带权利要求4所述表达载体的重组菌。

6.如权利要求5所述的重组菌,其特征在于,以大肠杆菌为宿主。

7.一种酶法合成非天然硒酸软骨素的方法,其特征在于,向反应体系中添加底物和催化剂,进行...

【技术特征摘要】

1.一种磺基转移酶突变体,其特征在于,所述突变体是在氨基酸序列如seq id no.1所示的野生酶的基础上,进行第138位的突变。

2.如权利要求1所述的突变体,其特征在于,所述第138位的突变是将精氨酸突变为缬氨酸。

3.编码权利要求1或2所述突变体的基因。

4.携带权利要求3所述基因的表达载体。

5.表达权利要求1或2所述突变体或携带权利要求4所述表达载体的重组菌。

6.如权利要求5所述的重组菌,其特征在于,以大肠杆菌为宿主。

【专利技术属性】
技术研发人员:王璐金鹏黄家骏张瑞雪
申请(专利权)人:浙江农林大学
类型:发明
国别省市:

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