一种非天然硒基供体3′-磷酸腺苷-5′-磷酸硒酸的合成方法技术

技术编号:42896169 阅读:32 留言:0更新日期:2024-09-30 15:13
本发明专利技术公开了一种非天然硒基供体3′‑磷酸腺苷‑5′‑磷酸硒酸的合成方法,属于生物工程技术领域。本发明专利技术首次通过hPAPSS1实现了非天然硒基活性供体PAPSe的生物合成,进一步,通过对hPAPSS1的APSe底物结合相关位点的改造,成功获得了催化性能提高的突变体。相较于原始酶hPAPSS1,突变体PAPSe转化率较野生型提高至1.78倍以上。本发明专利技术为硒代有机物的生物合成开辟新路径和奠定理论技术基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种非天然硒基供体3′-磷酸腺苷-5′-磷酸硒酸的合成方法,属于生物工程。


技术介绍

1、硒(se)是一种生命活动必需的微量营养元素,主要以硒代有机物的形式存在于生物机体中,并参与重要的生理过程。由于硒具有营养学和毒理学作用,在营养健康和生物医药领域受到了广泛关注。随着人们对健康、营养需求的快速提升,在食品和膳食补充剂中主要以硒代蛋氨酸、硒代半胱氨酸、硒多糖等作为se补充的重要来源。然而自然界低丰度的硒源,含硒天然产物和硒掺入酶系在大自然中并不常见。并且,硒代有机物的生物合成酶系缺乏和机制仍不清晰,严重制约了其广泛挖掘与应用研究。

2、已知3′-磷酸腺苷-5′-磷酰硫酸(3′-phosphoadenosine-5′-phosphosulfate,paps)作为硫酸根基团供体用于由多种磺基转移酶催化的所有生物硫酸化反应。paps可通过腺苷5′-三磷酸硫酸化酶(atps)、腺苷5′-磷酸硫酸激酶(apsk)和paps合成酶(papss)将atp硫酸化和磷酸化而合成的。由于硒与硫元素化学性质极其类似,硫代谢酶系对s和se底物的分辨能力较本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种3′-磷酸腺苷-5′-磷酰硫酸合成酶突变体,其特征在于,所述突变体是在氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的野生酶的基础上,进行第109位和第133位的至少一种突变。

2.如权利要求1所述的突变体,其特征在于,所述第109位的突变为将第109位天门冬酰胺突变为精氨酸;所述第133位的突变为将第133位的丝氨酸突变为谷氨酸。

3.编码权利要求1或2所述突变体的基因。

4.携带权利要求3所述基因的表达载体。

5.含有权利要求1或2所述突变体或权利要求4所述表达载体的重组菌。

6.如权利要求5所述的重组菌,其特征在于,以大肠...

【技术特征摘要】

1.一种3′-磷酸腺苷-5′-磷酰硫酸合成酶突变体,其特征在于,所述突变体是在氨基酸序列如seq id no.1所示的野生酶的基础上,进行第109位和第133位的至少一种突变。

2.如权利要求1所述的突变体,其特征在于,所述第109位的突变为将第109位天门冬酰胺突变为精氨酸;所述第133位的突变为将第133位的丝氨酸突变为谷氨酸。

3.编码权利要求1或2所述突变体的基因。

4.携带权利要求3所述基因的表达载体。

5.含有权利要求1或2所述突变体或权利要求4所述表达载体的重组菌。

6.如权利要求5所述的重组菌,其特征在于,以大肠杆菌为宿主。

7.一种酶法合成非天然硒基供体3′-磷酸腺苷-5′-磷酸硒酸的方法,其特征在于,向反应体系中添加底物和催化剂,进行反应;所述底物包括atp和硒供体;...

【专利技术属性】
技术研发人员:金鹏王璐张瑞雪黄家骏
申请(专利权)人:浙江农林大学
类型:发明
国别省市:

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