富集增敏RPA-CRISPR一管式检测样品前处理装置以及应用和RPA-CRISPR检测方法制造方法及图纸

本发明专利技术涉及生化分析和分子诊断领域，具体的说是一种富集增敏RPA‑CRISPR一管式检测样品前处理装置以及应用和RPA‑CRISPR检测方法。富集装置包括注射器、FTA卡及连接座，其中，连接座一端插入注射器，另一端设有毛细管，连接座内设FTA卡。本发明专利技术构建带有FTA卡的富集增敏装置对病原体基因组进行快速采集、提取，并使得采集的样本能够在室温下长期储存和运输，简化了样品前处理的繁琐步骤，节省了操作时间。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生化分析和分子诊断领域，具体的说是一种富集增敏rpa-crispr一管式检测样品前处理装置以及应用和rpa-crispr检测方法。

技术介绍

1、食源性疾病是全球性公共卫生问题，给人类健康、食品工业的发展以及经济社会发展带来严重不良影响。食源性病原体的准确快速检测，是防止食源性疾病暴发的有效手段。目前常见方法包括：传统平板培养法、免疫学检测法、核酸检测法，存在操作步骤繁琐、检测周期长、成本较高、依赖实验室和专业人员等缺点，限制了其应用范围。

2、近年来，规律成簇的间隔短回文重复序列(clustered regularly interspacedshort palindromic repeats,crispr)及其相关蛋白(crispr-associated protein,cas)组成的crispr/cas系统在分子诊断领域迅速崛起。由于其优异的特异性、可编程性、省时省力、易于操作等特点，crispr/cas系统在食源性病原体即时检测领域展现出巨大潜能。结合重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase ampli本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种富集增敏RPA-CRISPR一管式检测样品前处理装置，其特征在于：富集装置包括注射器、FTA卡及连接座，其中，连接座一端插入注射器，另一端设有毛细管，连接座内设FTA卡。

2.根据权利要求1所述的富集增敏RPA-CRISPR一管式检测样品前处理装置，其特征在于：所述FTA卡直径与连接座内径相等。

3.一种权利要求1所述的装置的应用，其特征在于：所述装置在RPA-CRISPR一管式检测中的应用。

4.根据权利要求3所述的装置的应用，其特征在于：所述富集增敏装置用于食源性病原体大肠埃希氏菌不同血清型的指示菌检测在RPA-CRISPR一管式检测中的应...

【技术特征摘要】

1.一种富集增敏rpa-crispr一管式检测样品前处理装置，其特征在于：富集装置包括注射器、fta卡及连接座，其中，连接座一端插入注射器，另一端设有毛细管，连接座内设fta卡。

2.根据权利要求1所述的富集增敏rpa-crispr一管式检测样品前处理装置，其特征在于：所述fta卡直径与连接座内径相等。

3.一种权利要求1所述的装置的应用，其特征在于：所述装置在rpa-crispr一管式检测中的应用。

4.根据权利要求3所述的装置的应用，其特征在于：所述富集增敏装置用于食源性病原体大肠埃希氏菌不同血清型的指示菌检测在rpa-crispr一管式检测中的应用。

5.根据权利要求4所述的装置的应用，其特征在于：所述不同血清型的指示菌检测时，rpa体系中，正向引物f为ttttaacgatcagttcgccgatgcagatattc、反向引物r为ctgatgctccatcacttcctgattattgacc；

6.一种食源性病原体的rpa-crispr一管式检测方法，其特征在于：通过权利要求1所述装置注射器将待检测样品透过装置的连接座内的fta卡，实现目标样品在fta圆片上的富集，并以其作为dna模板，结合rpa与crispr/cas 12a组成的检测体系，实现一管式高灵敏检测。<...

【专利技术属性】
技术研发人员：殷堃，晁安琪，胡沁沁，
申请(专利权)人：上海交通大学医学院，
类型：发明
国别省市：