【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物,具体涉及一种无血清悬浮培养的细胞的制备方法,以及通过该方法获得的细胞及其应用。
技术介绍
1、hek293细胞是经5型腺病毒(adenovirus 5type,ad5)75株系转化,含有ad5 e1区的人胚肾亚三倍体细胞系。hek293细胞具有转染效率高,易于培养等特点,是常用于表达外源基因的细胞株。hek293细胞允许腺病毒在其上增殖,因此被广泛应用于腺病毒载体的扩增。
2、但是贴壁培养的hek293细胞,需要使用一定浓度的牛血清,牛血清不仅价格昂贵,而且会引入外源微生物和致病因子的污染风险,使得质量难以控制。因此,需要能进行无血清悬浮培养的hek293细胞。
技术实现思路
1、为了解决现有技术中存在的上述技术问题之一,本公开提供了一种制备无血清悬浮培养的细胞的方法,以及通过该方法获得的hek293细胞系及其应用,该细胞系在基础研究以及临床应用方面均具有广泛的作用。
2、根据本公开的一个方面,提供了一种制备无血清悬浮培养的细胞的方法,所述方法包
...【技术保护点】
1.一种制备无血清悬浮培养的细胞的方法,其特征在于,所述方法包括:
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述细胞包括HeLa细胞、293细胞、Vero细胞、CHO-K1细胞、NIH-3T3细胞、PC-12细胞、BHK细胞,
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述振荡培养的转速为100~140rpm。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤3)的传代培养包括,当细胞活率下降至65~75%,离心,弃去约1/2~1/3的培养上清液,补充新鲜的无血清培养基,继续振荡培养。
5.根据权利要求4所述的方法,其特
...【技术特征摘要】
1.一种制备无血清悬浮培养的细胞的方法,其特征在于,所述方法包括:
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述细胞包括hela细胞、293细胞、vero细胞、cho-k1细胞、nih-3t3细胞、pc-12细胞、bhk细胞,
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述振荡培养的转速为100~140rpm。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤3)的传代培养包括,当细胞活率下降至65~75%,离心,弃去约1/2~1/3的培养上清液,补充新鲜的无血清培养基,继续振荡培养。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述上清液的体积为培养液的1/2~1/...
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。