一种无血清悬浮培养的细胞及其制备方法和应用技术

技术编号:42854939 阅读:74 留言:0更新日期:2024-09-27 17:21
本公开采用一步法无血清悬浮培养,获得无血清悬浮培养的细胞。本公开的制备无血清悬浮培养的细胞的方法操作简单,安全性好,可在1~1.5个月内完成驯化,驯化效率高。本公开的方法获得的无血清悬浮培养的HEK293S‑H1细胞系,细胞代次低、分散性好,结团率低、细胞生长状态稳定,细胞接种病毒时拥有高产毒能力,适合规模化生产病毒。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物,具体涉及一种无血清悬浮培养的细胞的制备方法,以及通过该方法获得的细胞及其应用。


技术介绍

1、hek293细胞是经5型腺病毒(adenovirus 5type,ad5)75株系转化,含有ad5 e1区的人胚肾亚三倍体细胞系。hek293细胞具有转染效率高,易于培养等特点,是常用于表达外源基因的细胞株。hek293细胞允许腺病毒在其上增殖,因此被广泛应用于腺病毒载体的扩增。

2、但是贴壁培养的hek293细胞,需要使用一定浓度的牛血清,牛血清不仅价格昂贵,而且会引入外源微生物和致病因子的污染风险,使得质量难以控制。因此,需要能进行无血清悬浮培养的hek293细胞。


技术实现思路

1、为了解决现有技术中存在的上述技术问题之一,本公开提供了一种制备无血清悬浮培养的细胞的方法,以及通过该方法获得的hek293细胞系及其应用,该细胞系在基础研究以及临床应用方面均具有广泛的作用。

2、根据本公开的一个方面,提供了一种制备无血清悬浮培养的细胞的方法,所述方法包括:1)使用完全培养本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种制备无血清悬浮培养的细胞的方法,其特征在于,所述方法包括:

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述细胞包括HeLa细胞、293细胞、Vero细胞、CHO-K1细胞、NIH-3T3细胞、PC-12细胞、BHK细胞,

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述振荡培养的转速为100~140rpm。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤3)的传代培养包括,当细胞活率下降至65~75%,离心,弃去约1/2~1/3的培养上清液,补充新鲜的无血清培养基,继续振荡培养。

5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述上清液的...

【技术特征摘要】

1.一种制备无血清悬浮培养的细胞的方法,其特征在于,所述方法包括:

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述细胞包括hela细胞、293细胞、vero细胞、cho-k1细胞、nih-3t3细胞、pc-12细胞、bhk细胞,

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述振荡培养的转速为100~140rpm。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤3)的传代培养包括,当细胞活率下降至65~75%,离心,弃去约1/2~1/3的培养上清液,补充新鲜的无血清培养基,继续振荡培养。

5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述上清液的体积为培养液的1/2~1/...

【专利技术属性】
技术研发人员:王玮陈凌郑雪华刘晓琳
申请(专利权)人:生物岛实验室
类型:发明
国别省市:

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