一种高活性脲酶结构基因及其表达和应用制造技术

本发明专利技术公开了一种高活性脲酶结构基因及其表达和应用，属于基因工程及生物矿化技术领域。本发明专利技术将定点突变改造得到的高活性脲酶结构基因UreABCEFGD‑mut连接到表达载体pRS426上，然后将重组质粒pRS426‑UreABCEFGD‑mut导入E.coli BL21(DE3)，异源表达了该高活性脲酶结构基因。用此重组脲酶菌可以产生具有高效水解尿素活性的脲酶蛋白，并应用于生物矿化，此重组脲酶菌表达产生的脲酶比原始菌表达产生的脲酶活性增强约1.2倍，能有效提高大肠杆菌水解尿素的能力，能够有效解决微生物诱导碳酸钙沉淀应用中脲酶活性较低的问题。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程及生物矿化，具体涉及一种高活性脲酶结构基因及其表达和应用。

技术介绍

1、混凝土是目前用量最大且最广的建筑材料，但其使用过程中由于内外因素作用下会产生不可避免的裂缝，如早期温度影响开裂、收缩导致产生裂纹以及后期的荷载裂缝等。裂缝的存在会导致建筑部件或整体上出现不稳定以及耐久性下降，而生物矿化材料是一种环境友好的、材料相容性强的、耐久度较高的新型粘合剂，能够应用于建筑工程与文物修复等环境，其中微生物修复材料相对高效且低毒，具有良好的应用前景。

2、微生物矿化技术是利用微生物将自然界的化学物质转化为矿物沉淀的方法，其应用大多数采用脲酶类型细菌，如巴氏芽孢杆菌(bacillus pasteurii或称为巴氏芽孢八叠球菌sporosarcina pasteurii)，该微生物是当前已知生物矿化能力最强、分解尿素效率较高的矿化菌株，其脲酶是目前已知微生物脲酶中活性最高的。该脲酶基因能够编码脱辅基蛋白urea、ureb、urec以及辅助蛋白ured、uree、uref、ureg，其中各种辅助蛋白能够促进脲酶中镍活性中心的组装，而具有活本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种高活性脲酶结构基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示。

2.一种包含权利要求1所述的高活性脲酶结构基因的重组载体。

3.根据权利要求2所述的重组载体，其特征在于，载体为pRS426质粒。

4.一种包含权利要求1所述的高活性脲酶结构基因的转化体。

5.根据权利要求4所述的转化体，其特征在于，宿主细胞为E.coli BL21(DE3)。

6.一种包含权利要求1所述的高活性脲酶结构基因的重组脲酶菌。

7.一种构建权利要求6所述的重组脲酶菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：>

8.一种制备...

【技术特征摘要】

1.一种高活性脲酶结构基因，其特征在于，其核苷酸序列如seq idno.1所示。

2.一种包含权利要求1所述的高活性脲酶结构基因的重组载体。

3.根据权利要求2所述的重组载体，其特征在于，载体为prs426质粒。

4.一种包含权利要求1所述的高活性脲酶结构基因的转化体。

5.根据权利要求4所述的转化体，其特征在于，宿主细胞为e.coli bl21(de3)。

【专利技术属性】
技术研发人员：刘炜，
申请(专利权)人：广东腐蚀科学与技术创新研究院，
类型：发明
国别省市：