大黄鱼抗菌肽Hepcidin-like的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种大黄鱼抗菌肽Hepcidin‑like的制备方法，并提供了大黄鱼抗菌肽Hepcidin‑like基因的编码序列以及氨基酸序列；给出具有序列表中序列1的开放阅读框和系列表中序列2的氨基酸序列；Lc‑HepL的ORF克隆；构建表达载体；重组表达载体pET‑32a‑HepL在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)pLys中转化宿主细胞并对宿主细胞进行诱导表达，获得表达产物；分离纯化得到的表达产物，得到重组蛋白Lc‑HepL；Lc‑HepL对刺激隐核虫具有抑杀活性，在制备抗虫药物和作为水产养殖业中防治病害的饲料添加剂中应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及抗菌肽，更具体的说是涉及大黄鱼抗菌肽hepcidin-like的制备方法。

技术介绍

1、抗菌肽是生物防御系统产生的一类具有对抗外源性病原体活性的肽类物，具有广谱抑杀菌活性，包括革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、真菌、寄生虫、病毒和肿瘤细胞。因此，抗菌肽在医药、农业、畜牧业等多个领域都具有重要的潜在应用前景。

2、hepcidin是一类具有β-折叠结构的抗菌肽，2002年首次从杂交斑纹鲈鱼的鳃中分离获得了一个hepcidin的成熟肽片段，具有广谱抗菌活性。迄今，已从多种鱼类中分离克隆到h e p c i d i n基因，包括虹鳟鱼(o n c o rh y n c h us m y k i s s)、黑鲷(a ca n t h o p a g ru s s c h l e g e l ii b)、大西洋马哈鱼(sa l m o s a l a r)、大黄鱼(larimichthyscrocea)。鱼类hepcidin的研究，主要集中在与细菌感染和炎症相关的研究上，更关注其在先天性免疫系统中的作用。大黄鱼hepcidin为阳离子抗菌肽，由本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种大黄鱼抗菌肽Hepcidin-like的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述大黄鱼抗菌肽Hepcidin-like的制备方法，其特征在于在步骤2)中，所述Lc-HepL的ORF克隆的方法为：利用健康大黄鱼鳃提取总RNA并反转录为cDNA模板，根据GeneBank公布Lc-HepL的cDNA序列设计带有限制性内酶切位点(EcoRI/Xho I)引物，克隆获得Lc-HepL的ORF中除编码信号肽的序列。

3.如权利要求2所述大黄鱼抗菌肽Hepcidin-like的制备方法，其特征在于在步骤3)中，所述构建表达载体的具体方法为：将步骤2)中...

【技术特征摘要】

1.一种大黄鱼抗菌肽hepcidin-like的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述大黄鱼抗菌肽hepcidin-like的制备方法，其特征在于在步骤2)中，所述lc-hepl的orf克隆的方法为：利用健康大黄鱼鳃提取总rna并反转录为cdna模板，根据genebank公布lc-hepl的cdna序列设计带有限制性内酶切位点(ecori/xho i)引物，克隆获得lc-hepl的orf中除编码信号肽的序列。

3.如权利要求2所述大黄鱼抗菌肽hepcidin-like的制备方法，其特征在于在步骤3)中，所述构建表达载体的具体方法为：将步骤2)中获得的带有酶切位点的lc-hepl的...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑利兵，陈佳，
申请(专利权)人：宁德泩泩渔业科技有限公司，
类型：发明
国别省市：