一种环状RNA的制备和其专用载体及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种环状RNA的制备和其专用载体及应用。本发明专利技术提供了一种制备表达目标蛋白的环状RNA的方法，为将配体添加至前体RNA编码区的非环化区域中任一组分的上游或下游，且所述前体RNA编码区的环化区域不含有所述配体，待所述前体RNA编码区体外转录并环化后，得到含有环状RNA的转录产物，再通过与所述配体结合的受体纯化所述环状RNA；本发明专利技术的实验证明，本发明专利技术提供了一种获得环状RNA的新方法，包括用于纯化环状RNA的载体设计、环状RNA的制备及纯化过程，实现非RNase R酶切依赖的环状RNA纯化方法，为环状RNA的制备提供了一种经济、便捷且高效的方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，涉及一种环状rna的制备和其专用载体及应用。

技术介绍

1、环状rna(circular rna,circrna)是一类不具有5'端帽子和3'端poly(a)尾巴、以共价键形成闭合环状的rna分子。与传统的线性rna-mrna一样，环状rna也可以编码和翻译蛋白质，但是有其独特的优势。首先，环状rna不易被核酸外切酶降解，比mrna更稳定。其次，环状rna不需要加帽及修饰核苷酸，生产成本低。这些特性使得环状rna有望作为mrna的替代物用于疫苗及多肽/蛋白质替代疗法的开发。

2、目前常用的一种外源rna环化策略是通过核酶催化rna自剪接。核酶是一段具有酶活性的rna核酸序列。具有自剪接活性的核酶通常有两大类：包括i型自剪接内含子(或简称i型内含子)和ii型自剪接内含子(或简称ii型内含子)。wesselhoeft等人报道了基于i型内含子设计的排列的内含子和外显子剪接策略(permuted intron-exon，pie)(wesselhoeft,r.a.et al.engineering circular rna for p本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种制备表达目标蛋白的环状RNA的方法，为将配体添加至前体RNA编码区的非环化区域中任一组分的上游或下游，且所述前体RNA编码区的环化区域不含有所述配体，待所述前体RNA编码区体外转录并环化后，得到含有环状RNA的转录产物，再通过与所述配体结合的受体纯化所述环状RNA；

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：

4.根据权利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：

6.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于：</p>

7.根据...

【技术特征摘要】

1.一种制备表达目标蛋白的环状rna的方法，为将配体添加至前体rna编码区的非环化区域中任一组分的上游或下游，且所述前体rna编码区的环化区域不含有所述配体，待所述前体rna编码区体外转录并环化后，得到含有环状rna的转录产物，再通过与所述配体结合的受体纯化所述环状rna；

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：

4.根据权利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：

6...

【专利技术属性】
技术研发人员：潘登，朱思然，郭婵元，史晓雨，钱志康，
申请(专利权)人：纳美信上海生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：