一种基于电化学发光检测疾病标志物hsa-miRNA-10a-5p含量的方法技术

本发明专利技术公开了一种基于电化学发光检测疾病标志物hsa‑miRNA‑10a‑5p含量的方法，包括：S1.将待测样品进行超支化滚环扩增，得到扩增液；S2.向扩增液中加入发光体进行反应，然后稀释，并加入共反应剂，得到待测液；S3.以待测液作为电解液，将工作电极、对电极以及参比电极置于电解液中，使用循环伏安法施加电压，获得电化学发光信号强度ECL<subgt;1</subgt;；再以空白样品作为电解液，按照同样的方法，获得电化学发光信号强度ECL<subgt;0</subgt;；则待测样品的电化学发光信号强度的绝对值ΔECL＝|ECL<subgt;1</subgt;‑ECL<subgt;0</subgt;|；S4.根据工作曲线及ΔECL，计算出待测样品中疾病标志物hsa‑miRNA‑10a‑5p的含量。本发明专利技术提供的方法，可以实现对血液或组织中疾病标志物miRNA含量的检测，该方法灵敏度高，检测限低，抗污染能力强，无需复杂的样品前处理步骤。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及电化学传感，具体涉及一种基于电化学发光检测疾病标志物hsa-mirna-10a-5p含量的方法。

技术介绍

1、microrna(mirna)是长度为19至25个核苷酸的内源性非编码rna。近年来，研究表明mirna可以充当癌基因或抑癌基因，在细胞分化、增殖、凋亡和细胞转移等癌症发生过程中具有重要作用。此外，mirna还可作为疾病标志物在多种癌症如的早期诊断和预后中发挥作用。血液、细胞、组织等生物样本成分复杂，在对其进行常规的生理生化分析之前通常需要复杂的样品前处理以去除基质干扰。而mirna较为敏感，在前处理过程中容易破碎，需要进行更加精细复杂的前处理，这无形中提高了分析的人力物力成本，延长了检测的时间。因此有必要开发更加便捷、灵敏的mirna分析方法。

2、目前对mirna进行分析的方法主要有rt-pcr、电化学、电化学发光、荧光等，其中电化学发光结合了电化学和化学发光的原理，是指在电极上施加电压产生电生物质，电生物质之间或电生物质与其他物质之间发生进一步反应产生的化学发光现象。在此过程中，电信号转化为光信号，并且结合了电化学本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于电化学发光检测疾病标志物hsa-miRNA-10a-5p含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种基于电化学发光检测疾病标志物hsa-miRNA-10a-5p含量的方法，其特征在于，步骤S1中，所述待测样品为裂解后的血液样品或组织样品；和/或，

3.根据权利要求2所述的一种基于电化学发光检测疾病标志物hsa-miRNA-10a-5p含量的方法，其特征在于，步骤a中，所述连接反应的时间为0.5～3h，温度为10～37℃；和/或，

4.根据权利要求1所述的一种基于电化学发光检测疾病标志物hsa-miRNA-10a-5p...

【技术特征摘要】

1.一种基于电化学发光检测疾病标志物hsa-mirna-10a-5p含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种基于电化学发光检测疾病标志物hsa-mirna-10a-5p含量的方法，其特征在于，步骤s1中，所述待测样品为裂解后的血液样品或组织样品；和/或，

3.根据权利要求2所述的一种基于电化学发光检测疾病标志物hsa-mirna-10a-5p含量的方法，其特征在于，步骤a中，所述连接反应的时间为0.5～3h，温度为10～37℃；和/或，

4.根据权利要求1所述的一种基于电化学发光检测疾病标志物hsa-mirna-10a-5p含量的方法，其特征在于，步骤s2中，所述发光体包括ru(phen)32+；和/或，

5.根据权利要求4所述的一种基于电化学发光检测疾病标志物hsa-mirna-10a-5p含量的方法，其特征在于，步骤s2中，向扩增液中加入发光体使其浓度为0.01～0.5mm；所述反应的时间为5～180min；和/或，

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【专利技术属性】
技术研发人员：王伟佳，王娟，刘静，洪明，董谦，
申请(专利权)人：中山市人民医院，
类型：发明
国别省市：