【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及幽门螺杆菌培养，特别涉及一种幽门螺杆菌培养基、培养方法及培养系统。
技术介绍
1、幽门螺杆菌(helicobacterpylori,hp)的持续感染与严重胃部并发症的发生有关。根据globocan2020报告，胃癌是导致癌症相关性死亡的第四大常见病因。人体感染hp，如不接受规范治疗，可终生带菌，因此确诊感染hp后，根除治疗是有必要的。目前抗菌药物治疗是hp根除的主要方案，成功根除hp感染可以降低出现严重胃部并发症的风险，故而建议所有幽门螺杆菌感染呈阳性的患者都采用该方案治疗。然而，由于hp对抗生素的耐药性上升，部分患者治疗效果并不理想，该菌感染的普遍复发率、再发率和再感染率不断攀升，有研究表明在接受过hp感染治疗的患者中，仅35％接受了用于确认感染根除情况的随访检查，并且许多治疗失败的患者再次使用了相同的治疗方案，因此对首次根除治疗失败的患者，hp的体外药敏试验结果更有利于临床治疗方案的改进。
2、目前国内已有部分医院开展hp的培养鉴定及药敏检测，采用的方法有e试验法、纸片扩散法(k-b法)和肉汤稀释法。但受限于检测方法本身原因或检测试剂自身原因，hp的培养鉴定及药敏未能普遍推广。如e试验法成本昂贵且占用培养空间大；k-b法尚处于验证阶段，且公认度相对较低；肉汤稀释法是目前推广度最高的，但因试剂稳定性问题，实验结果重复性差，未能在省内(浙江省)多数三甲医院铺展开。
3、目前市面上已有的幽门螺杆菌(hp)液体转运培养基或幽门螺杆菌液体培养液已有数种，已经进入医院的hp液体培养试剂主要为珠海某公
4、因此，目前用于幽门螺杆菌的培养基，存在稳定性不足、无法保证hp纯度和无法满足临床检测需求的问题。
技术实现思路
1、本专利技术为了解决现有用于幽门螺杆菌的培养基所存在的上述技术问题，提供了一种稳定性良好、能保证hp纯度和能够满足临床检测需求的幽门螺杆菌培养基、培养方法及培养系统。
2、本专利技术的第一种技术方案：幽门螺杆菌基础转运培养基，按重量份计包括以下组分，
3、蛋白胨8000～12000份，脱水小牛脑浸粉10000～15000份，脱水牛心浸粉3000～7000份，氯化钠3000～7000份，葡萄糖1000～3000份，磷酸二氢钠1000～4000份，酵母浸出粉1000～4000份。本专利技术中的蛋白胨能为hp的培养提供丰富的氨基酸，特别是含硫氨基酸，能为hp生长提供需要的维生素和生长因子，能良好为hp培养提供氮源和碳源；脱水小牛脑浸粉能为hp培养提供丰富氮源、碳源、维生素和生长因子；脱水牛心浸粉也能为hp培养提供丰富氮源、碳源、维生素和生长因子；氯化钠可维持hp培养过程中均衡的渗透压；葡萄糖能为hp培养提供丰富能源；磷酸二氢钠作为hp培养过程中良好的缓冲剂；酵母浸出粉能为hp的培养提供氨基酸和小肽这样的速效氮源，也能为hp的培养提供b族维生素和微量元素；本专利技术中的各组份配比后相互协同，一起为hp提供营养丰富的培养环境；本专利技术对胃黏膜标本中hp具有良好的保护作用，hp初筛培养辨识率良好，可保存纯菌不少于24小时，可以确保标本采集后在到达医院或外送培养的时间；本专利技术在使用时在置于血平板上使用，在血平板上使用时为固体形态培养基，分区划线，有利于hp菌落与杂菌菌落分离，适合hp的更稳定培养，能有效去除杂菌干扰，确保药敏试验使用的是hp细菌，而非杂菌，药敏培养性能稳定性也较好，保证后续药敏检测的准确性。
4、作为优选，按重量份计包括以下组分，
5、蛋白胨8500～11500份，脱水小牛脑浸粉11000～14000份，脱水牛心浸粉4000～6000份，氯化钠4000～6000份，葡萄糖1500～2500份，磷酸二氢钠1500～3500份，酵母浸出粉1500～3500份。
6、作为优选，按重量份计包括以下组分，
7、蛋白胨9000～11000份，脱水小牛脑浸粉11500～13500份，脱水牛心浸粉4500～5500份，氯化钠4500～5500份，葡萄糖1800～2300份，磷酸二氢钠2000～3000份，酵母浸出粉2000～3000份。
8、作为优选，按重量份计包括以下组分，
9、蛋白胨9500～10500份，脱水小牛脑浸粉12000～13000份，脱水牛心浸粉4800～5200份，氯化钠4800～5200份，葡萄糖1900～2200份，磷酸二氢钠2200～2800份，酵母浸出粉2200～2800份。
10、作为优选，按重量份计包括以下组分，
11、蛋白胨10000份，脱水小牛脑浸粉12500份，脱水牛心浸粉5000份，氯化钠5000份，葡萄糖2000份，磷酸二氢钠2500份，酵母浸出粉2500份。
12、本专利技术的第二种技术方案：幽门螺杆菌筛选转运培养基，按重量份计包括以下组分，
13、蛋白胨8000～12000份，脱水小牛脑浸粉10000～15000份，脱水牛心浸粉3000～7000份，氯化钠3000～7000份，葡萄糖1000～3000份，磷酸二氢钠1000～4000份，酵母浸出粉1000～4000份，万古霉素8～12份，甲氧苄啶15～25份，两性霉素b3～7份，头孢磺啶8～12份。本专利技术中的蛋白胨能为hp的培养提供丰富的氨基酸，特别是含硫氨基酸，能为hp生长提供需要的维生素和生长因子，能良好为hp培养提供氮源和碳源；脱水小牛脑浸粉能为hp培养提供丰富氮源、碳源、维生素和生长因子；脱水牛心浸粉也能为hp培养提供丰富氮源、碳源、维生素和生长因子；氯化钠可维持hp培养过程中均衡的渗透压；葡萄糖能为hp培养提供丰富能源；磷酸二氢钠作为hp培养过程中良好的缓冲剂；酵母浸出粉能为hp的培养提供氨基酸和小肽这样的速效氮源，也能为hp的培养提供b族维生素和微量元素；万古霉素作为抗生素，能通过抑制杂菌的生长和繁殖来杀死杂菌，只有hp能良好生长培养，具有了抑制杂菌生长繁殖的初筛选性能，初筛培养辨识率较好；甲氧苄啶作为抗生素，能通过抑制杂菌的叶酸代谢来干扰杂菌的生长和繁殖，只有hp能良好生长培养，具有了抑制杂菌生长繁殖的初筛选性能，初筛培养辨识率较好；两性霉素b作为抗生素，通过与固醇结合,干扰敏感杂菌的细胞膜渗透性，从而能够抑制杂菌活性，只有hp能良好生长培养，具有了抑制杂菌生长本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.幽门螺杆菌基础转运培养基，其特征是：按重量份计包括以下组分，
2.幽门螺杆菌筛选转运培养基，其特征是：按重量份计包括以下组分，
3.根据权利要求2所述的幽门螺杆菌筛选转运培养基，其特征是：所述筛选转运培养基的稳定性测试包括以下步骤，
4.根据权利要求3所述的幽门螺杆菌筛选转运培养基，其特征是：所述步骤(A01)转运培养基中标准菌株NCTC11637的浓度为104CFU/ml～105CFU/ml；所述步骤(A01)运输管中菌液的体积占运输管整体体积的75％～85％；所述步骤(A03)中的微需氧条件为，5％O2,7.5％CO2,7.5％H2，80％N2。
5.幽门螺杆菌生长培养基，其特征是：按重量份计包括以下组分，
6.幽门螺杆菌的培养方法，其特征是：包括以下步骤，
7.根据权利要求6所述的幽门螺杆菌的培养方法，其特征是：所述步骤(S01)中，若胃黏膜样本取得时间小于5h，则将基础转运培养基和筛选转运培养基置于30℃～38℃温箱或室温保存；若胃黏膜样本取得时间为5h～24h，则将基础转运培养基和筛选转运培养基
8.根据权利要求6所述的幽门螺杆菌的培养方法，其特征是：所述步骤(S10)中的药敏结果为孔板每个孔内药物的最低抑菌浓度MIC值；所述MIC为用肉眼在试管或微量稀释孔中所见能完全抑制细菌生长的最低抗菌药物浓度，若用肉眼无法辨别孔中是否有细菌生长，则使用观察装置帮助进行微量稀释试验结果的判断和记录。
9.幽门螺杆菌的培养系统，包括存放筒(100)，其特征是：所述存放筒(100)内部转动连接有转移组件(200)，所述转移组件(200)底壁上阵列设置有托台组件(300)，所述托台组件(300)正上方设置有罩筒组件(400)，所述罩筒组件(400)与托台组件(300)合围成密封筒体，所述转移组件(200)顶部设置有气体循环组件(500)，所述气体循环组件(500)与存放筒(100)的内部连通，所述转移组件(200)上设置有推送组件(600)，所述存放筒(100)侧面设置有密封组件(700)，所述气体循环组件(500)用于驱动罩筒组件(400)向上移动与托台组件(300)分离，并驱动托台组件(300)从密封组件(700)移动至存放筒(100)外侧。
10.根据权利要求9所述的幽门螺杆菌的培养系统，其特征是：包括分切台(800)，所述分切台(800)顶部开设有阶梯槽(801)，所述分切台(800)上方设置有分切组件(900)；所述分切组件(900)包括支撑架(901)，所述支撑架(901)顶部固定安装有气缸二(902)，所述气缸二(902)输出端贯穿支撑架(901)并固定安装有套筒(903)，所述套筒(903)内滑动连接有滑动片(904)，所述滑动片(904)顶部固定安装有多个连杆(905)，所述连杆(905)贯穿滑动连接在套筒(903)上，所述连杆(905)外侧套设有弹簧四(906)，所述弹簧四(906)固定安装在滑动片(904)和套筒(903)顶壁之间，所述滑动片(904)底部固定安装有网状切刀(907)，所述网状切刀(907)呈网格状。
...【技术特征摘要】
1.幽门螺杆菌基础转运培养基，其特征是：按重量份计包括以下组分，
2.幽门螺杆菌筛选转运培养基，其特征是：按重量份计包括以下组分，
3.根据权利要求2所述的幽门螺杆菌筛选转运培养基，其特征是：所述筛选转运培养基的稳定性测试包括以下步骤，
4.根据权利要求3所述的幽门螺杆菌筛选转运培养基，其特征是：所述步骤(a01)转运培养基中标准菌株nctc11637的浓度为104cfu/ml～105cfu/ml；所述步骤(a01)运输管中菌液的体积占运输管整体体积的75％～85％；所述步骤(a03)中的微需氧条件为，5％o2,7.5％co2,7.5％h2，80％n2。
5.幽门螺杆菌生长培养基，其特征是：按重量份计包括以下组分，
6.幽门螺杆菌的培养方法，其特征是：包括以下步骤，
7.根据权利要求6所述的幽门螺杆菌的培养方法，其特征是：所述步骤(s01)中，若胃黏膜样本取得时间小于5h，则将基础转运培养基和筛选转运培养基置于30℃～38℃温箱或室温保存；若胃黏膜样本取得时间为5h～24h，则将基础转运培养基和筛选转运培养基置于4℃～8℃环境中保存。
8.根据权利要求6所述的幽门螺杆菌的培养方法，其特征是：所述步骤(s10)中的药敏结果为孔板每个孔内药物的最低抑菌浓度mic值；所述mic为用肉眼在试管或微量稀释孔中所见能完全抑制细菌生长的最低抗菌药物浓度，若用肉眼无法辨别孔中是否有细菌生长，则使用观察装置帮助进行微量稀释试验结果的判断和记录。
9.幽门螺杆菌...
【专利技术属性】
技术研发人员：方云辉，郑焙文，陈云波，
申请(专利权)人：浙江大学医学院附属第一医院浙江省第一医院，
类型：发明
国别省市：
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